絹糸昆虫-与那国蚕における転移因子の動向に関する研究

丝虫与那国蚕转座因子动态研究

基本信息

  • 批准号:
    08760051
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.7万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

与那国蚕は沖縄県指定の天然記念物であるので,教育委員会に天然記念物現状変更等申請書を提出し,実験に供する許可をとった.終令幼虫5頭から,絹糸腺,及びマルピーギ管を摘出しDNAを抽出した.1)転移因子マリナ-について…保存された2箇所のアミノ酸配列をコードするdegenerate PCR primerを用い,文献の条件でPCR増幅を行ったがバンドは検出されなかった.次に同じ絹糸昆虫のセクロピア蚕及び蚕の2箇所のプライマー領域を比較検討し,degenerate primerのmixtureになっている部分の塩基を1塩基に固定したprimerを設計し,これを用いてPCR増幅を行った.その結果約500bpの付近に明瞭な1本のバンドが検出されたので,塩基配列を決定した.また既に明らかなセクロピア蚕の逆位繰り返し配列を用いてlong PCRを行ったところ,全ての固体において1.2kbの明瞭なバンドが検出されたので,これについて配列を決めた.5個体のうち2個体について,1.2kbより長いバンドが認められこれらの配列も決めた.1.2kbのクローンは500bpのクローン全長とほぼ同じ配列を含んでおり,マリナ-の全長であると考えられる.これは,マリナ-やTc1ファミリーに見られるDEモチーフ,特徴的な保存された2箇所のアミノ酸配列を有し,transposaseをコードしていると考えられる完全長のORFを持っていたので,多くの他の昆虫でとられているdefectiveなマリナ-と異なり,activeなものである可能性があり,ベクターとしての開発の期待ももてる.長い配列は,マリナ-にマリナ-が挿入されたユニットであること,蚕において,マリナ-に他の転移因子が挿入されたケースがあることにより,マリナ-は自分自身あるいは,他の転移因子のターゲットになり得ることが示唆された.2)R1Bm,R2Bm,BMC1について…蚕に対して特異的に増幅するプライマーを用い,同じ条件でPCRを行った.その結果,R1Bmについては増幅が見られたが,その他の2つについては増幅されなかった.PCRに関してもう少し条件を検討してみる予定である.
With the national silkworms and silkworms designated as natural memorials, the Education Commission will apply for applications such as natural memorials, which may be available. The larvae were exposed to 5-fold larvae, glands, and tubes to extract the DNA. 1) transfer factor (TF). Save the "degenerate PCR primer" in the document "condition" PCR in the document "condition", "PCR", "row", "I", "I", "I". In the same series of insects, silkworms and silkworms are used to compare the fields of the silkworms and the silkworms, and the degenerate primer mixture is used to fix the primer device, and the PCR frame is used to fix the device. The result of the experiment is that 500bp knows that in this book, you will be able to make a decision on the basis of the data. This is not only a good idea, but also a good idea. In this way, you can use the long PCR line to make sure that you know how to do this, and that you can use the 1.2kb to figure out how to do this, and then you can find out how to do it. The whole length of the 1.2kb system is the same as that of the full length of the 500bp system, which includes the total length of the queue, and the total length of the system. This is the most important thing in the world. In this case, you can find out that there is something wrong with you, Tc1, you know, there's something wrong with you, you know, it's possible for you to be completely long, ORF, insect, insect, We are looking forward to hearing from each other. For a long time, please tell me that the transfer factor is not available. 2) R1Bmno, R2BmGo, BMC1, BMC1, etc. The breadth of the silkworm tree is the same as that of the PCR. The results show that the R1Bmimage shows that you can see the picture, and you can tell him that the frame is different. The PCR protocol shows that the condition is different and the condition is different.

项目成果

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知道了