Elucidation of biological significance of GABA receptors in extrasynaptic

突触外 GABA 受体的生物学意义的阐明

• 批准号: 22KJ2644
• 负责人: 貞光 謙一郎
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Aoyama Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2644/
• 关键词: GABA; glycine; GABA(A)受容体; glycine受容体; 抑制性シナプス伝達; ゼブラフィッシュ

抑制性シナプスには、五量体型のGABA受容体(GABAR)とglycine受容体(GlyR)が存在し、抑制性神経伝達を担う。GABAR subunitとGlyR subunitから成るhybrid受容体が存在し、GABAとglycineそれぞれに応答するかを明らかにするために研究を進めた。先行研究を基に、GABAR subunitでは23種類のうち、GABARa1,GABARb3,GABAg2を、GlyR subunitでは7種類のうち、GlyRa1, GlyRbbのcRNA合成をそれぞれ単独に行った。cRNAはさまざまな組み合わせでXenopusの卵母細胞にinjectionすることで卵母細胞膜表面上に複数パターンのsubunitを発現させた。膜表面上に発現したsubunitは、二電極式ボルテージクランプ法による電流記録を行うことで、GABAやglycineへの開口特性を評価し、hybrid受容体を形成するか確認した。まずは、GABARb3とGABARg２とGlyRa1を共発現させると、それぞれGABAとglycine両方の暴露により開口が見られた。しかし、GABARb3とGABARg2から構成される受容体はGABA暴露で、GlyRa1のみから構成される受容体はglycine暴露で開口することから、それぞれGABAとglycine両方の暴露に応答するhybrid受容体を評価できたと断言できない。この問題点を解決するために今後は、GABARb3とGABARg2のhetero五量体発現抑止及びGlyRa1のhomo五量体発現抑止のために、GABARb3とGlyRa1のsubunitを連結させたconcatemerをクローニングする。合成したconcatemerはGABARg2と共発現させ、GABAとglycine両方に対して応答するかを検証する。

Inhibitory シナプスに シナプスに, pentagonal type <s:1> GABA receptor (GABAR)とglycine receptor (GlyR)が exist, inhibitory hormones 伝 reach を and う. GABAR subunit と GlyR subunit か ら into る hybrid let body exist が し, GABA と glycine そ れ ぞ れ に 応 answer す る か を Ming ら か に す る た め を に research into め た. Leading research を に, GABAR subunit で は 23 kinds の う ち, GABARa1 GABARb3, GABAg2 を, GlyR subunit で は 7 kinds の う ち, GlyRa1 GlyRbb の cRNA synthesis を そ れ ぞ れ 単 line alone に っ た. CRNA は さ ま ざ ま な group み close わ せ で Xenopus の oocytes に injection す る こ と で oocyte membrane surface に plural パ タ ー ン の subunit を 発 now さ せ た. On the membrane surface に 発 now し た subunit は, two electrode type ボ ル テ ー ジ ク ラ ン プ method に よ る line current record を う こ と で, GABA や glycine へ の openings feature を review 価 し を, hybrid let body formation す る か confirm し た. ま ず は, GABARb3 と GABARg2 と GlyRa1 を 発 now total さ せ る と, そ れ ぞ れ GABA と glycine struck party の exposed に よ り openings が see ら れ た. し か し, GABARb3 と GABARg2 か ら constitute さ れ る let body exposed は GABA で, GlyRa1 の み か ら constitute さ れ る by let body は glycine exposed opening で す る こ と か ら, そ れ ぞ れ GABA と glycine struck party の exposed に 応 answer す る hybrid by let body を review 価 で き た と assertion Youdaoplaceholder0 な な で. こ の problem point を す る た め に future は, GABARb3 と GABARg2 の hetero five quantity body 発 now to suppress and び GlyRa1 の homo five quantity body 発 now suppress の た め に, GABARb3 と GlyRa1 の subunit を link さ せ た concatemer を ク ロ ー ニ ン グ す る. Synthetic し た concatemer は GABARg2 と 発 now total さ せ, GABA と glycine struck party に し seaborne て 応 answer す る か を 検 card す る.

项目成果

全ゲノムシーケンスを用いたゼブラフィッシュ野生型系統の多様性評価

使用全基因组测序评估斑马鱼野生型品系的多样性

• 发表时间: 2022
• 作者: 貞光 謙一郎;鹿島 誠;石岡 亜季子;中山 里実;中山 涼子;岡本 仁;平田 普三
• 通讯作者: 平田 普三

Wild-type lines and new inbred strains of zebrafish evaluated by whole genome sequencing

通过全基因组测序评估斑马鱼野生型系和新近交系

• 发表时间: 2022
• 作者: Sadamitsu;K.;Kashima;M.;Shinya;M.;Ashida;H.;Ishioka;A.;Nakayama;S.;Nakayama;R.;Okamoto;H.;Sakai;N. and Hirata;H.
• 通讯作者: H.