反応場の情報を統合した植物RISC形成機構の解明

整合反应场信息阐明植物RISC形成机制

• 批准号: 22KJ2862
• 负责人: 藤本 祐司
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Rikkyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2862/
• 关键词: processing body; RNAサイレンシング

2022年度開設の研究室のため、セットアップの作業を行なった。植物の生育、培養細胞の維持管理に問題がないことを確認した。また、シロイヌナズナのDCP1、SGS3のクローニングを行い、アグロインフィルトレーション法による一過的発現によりNicotiana benthamianaの葉において、GFPやmcherryなどの蛍光タンパク質を付加したこれらのタンパク質の局在が、先行研究や前所属における結果と変わりなく観察できることを確認した。SGS3については、N末端側に存在するプリオン様ドメインが局在に影響することが報告されているが、この局在変化についても同様に再現できることを合わせて確認した。SGS3については、全長タンパク質と共に、これらの変異体についてもFAPS法による解析に供試したいと考えている。split TurboID法に用いるTurboIDおよびその分割変異体についても作成を進めており、今後これらのN. benthamiana葉内における活性を確認する予定である。SGS3に加えて、二次的siRNA生成に必要な因子であるAGO7、miR390、TAS3、SDE5、RDR6についてもN. benthamianaにおいて一過的に発現が可能であることを確認し、これらの因子の共発現によりtasiRNAがノーザンブロットで検出できる程度に蓄積することを確認した。今後はこれらの因子を共発現させた場合の局在の変化なども合わせて解析していく予定である。

In 2022, the <s:1> research laboratory <s:1> ため and the セットアップ <s:1> operation を line なった were established. Plant progeny, maintenance and management of cultured cells に issues がな とを とを とを とを confirmation of <s:1> た. ま た, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ の DCP1, SGS3 の ク ロ ー ニ ン グ を い, ア グ ロ イ ン フ ィ ル ト レ ー シ ョ ン method に よ after る 発 now に よ り Nicotiana Benthamiana の leaf に お い て, GFP や McHerry な ど の 蛍 light タ ン パ ク quality を pay plus し た こ れ ら の タ ン パ ク qualitative の に bureau before が, leading research や belongs お け る results と - わ り な く 観 examine で き る こ と を confirm し た. SGS3 に つ い て は exist, N terminal side に す る プ リ オ ン others ド メ イ ン が bureau に affect す る こ と が report さ れ て い る が, こ の bureau in - に つ い て も with others に reappearance で き る こ と を close わ せ て confirm し た. SGS3 に つ い て は, span タ ン パ ク qualitative と に, こ れ ら の - variant に つ い て も FAPS method に よ る parsing に selected し た い と exam え て い る. Split に TurboID method with い る TurboID お よ び そ の segmentation - variant に つ い て も made を into め て お り, future こ れ ら の n. benthamiana leaves within に お け る active を confirm す る designated で あ る. SGS3に plus えて, secondary siRNA generation に necessary な factors であるAGO7, miR390, TAS3, SDE5, RDR6に て て N. Benthamiana に お い て one of に 発 が may now で あ る こ と を confirm し, こ れ ら の factor の 発 now total に よ り tasiRNA が ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト で 検 out で き る degree に accumulation す る こ と を confirm し た. In the future, the <s:1> <s:1> れら <s:1> factor を will occur in させた situations where the <s:1> variation な <s:1> is combined with わせて analysis, and the <s:1> て く く く く is given as である.

项目成果

Short 5′ Untranslated Region Enables Optimal Translation of Plant Virus Tricistronic RNA via Leaky Scanning

短 5 英寸非翻译区可通过漏扫描实现植物病毒三顺反子 RNA 的最佳翻译

• DOI: 10.1128/jvi.02144-21
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Virology
• 影响因子: 5.4
• 作者: Fujimoto, Yuji;Keima, Takuya;Hashimoto, Masayoshi;Hagiwara-Komoda, Yuka;Hosoe, Naoi;Nishida, Shuko;Nijo, Takamichi;Oshima, Kenro;Verchot, Jeanmarie;Namba, Shigetou
• 通讯作者: Namba, Shigetou