Rubiconによる新規エクソソーム産生制御機構の解明

Rubicon 阐明新型外泌体产生控制机制

• 批准号: 22KJ2151
• 负责人: 柳川 恭佑
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2151/
• 关键词: エクソソーム; オートファジー; 老化

エクソソーム産生とオートファジーの関連は不明である。いくつかのオートファジー因子の欠損細胞ではエクソソーム産生が低下することが報告されているが、エクソソーム産生にオートファジー自体が必要か固有のオートファジー因子が必要なのかが明らかになっておらず、詳細な分子機構についても解明されていない。これらを明らかにするために、申請者らはオートファジー制御因子の中でエクソソーム産生を制御する因子を網羅的スクリーニングによって検証した。その結果、オートファジーの負の制御因子であるRubiconがエクソソーム産生が必要であることを見出した。Rubiconは一部が多胞性エンドソームに局在しており、既知のオートファジ―抑制経路と異なる経路でエクソソーム産生を制御していた。また、Rubiconの非オートファジー機能がいくつか報告されているが、それらとも異なった新規の経路であることが明らかとなった。Rubicon のインタラクトーム解析から得られた相互作用因子に対してスクリーニングを実施して、Rubiconと共に多胞性エンドソームで働く候補因子を同定した。Rubiconと新規因子は多胞性エンドソームの形成に必要であるという知見を得ており、Rubiconは多胞性エンドソーム上で内膜小胞形成を正に制御していることが示唆された。個体でもRubiconによるエクソソーム制御が見られるか検証したところ、マウスの血清中エクソソーム量がRubiconノックアウトマウスで低下することを見出した。加齢に伴い血清中エクソソーム量は増加していたが、Rubiconノックアウトではこの増加を抑制していた。加齢にともなって老化関連エクソソームが血中に増加することが示唆されており、Rubiconの発現抑制によって老化関連エクソソームの分泌を低下させることができるのではないかと考えて検証を進めている。

外泌体生产与自噬之间的关联尚不清楚。据报道，缺乏自噬因素的细胞中的外泌体产生降低，但是尚未阐明外泌体产生所需的自噬本身还是固有的自噬因子，并且尚未澄清详细的分子机制。为了澄清这些内容，申请人检查了通过全面筛选来调节自噬调节器中外泌体生产的因素。结果，我们发现外泌体产生需要Rubicon是自噬的负调节剂。 Rubicon通过不同于已知的自噬抑制途径不同的途径部分将其定位于多重内体内体和调节外泌体产生。此外，已经报道了Rubicon的几种非自助噬菌特征，但已经揭示了这是一条与之不同的新型途径。筛选了从Rubicon的Interactome分析获得的相互作用因子，以识别与多尖内体中与Rubicon一起使用的候选因素。我们发现，rubicon和新的因素是多旋星内体的形成所必需的，这表明Rubicon积极调节子宫内膜囊泡在多螺旋内体上形成。当我们检查在个体中是否观察到Rubicon诱导的外泌体调节时，我们发现Rubicon敲除小鼠中小鼠血清中的外泌体量减少。血清外泌体水平随着年龄的增长而增加，但Rubicon敲除抑制了这一增加。有人提出，与衰老相关的外泌体随着年龄的增长而增加，我们正在进行验证，认为抑制Rubicon的表达可以减少与衰老相关的外生体的分泌。