アテローム性動脈硬化の治療を目指したHDLの質的変化を規定するタンパク分子の探索

寻找调节 HDL 质变的蛋白质分子以治疗动脉粥样硬化

• 批准号: 22KJ2355
• 负责人: 立花 洸季
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyushu University (2023)The University of Tokushima (2022)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2355/
• 关键词: 高密度リポタンパク質; ApoA-I binding protein; アテローム性動脈硬化

高密度リポタンパク質（HDL）による脂質引き抜き反応は、末梢組織のコレステロールを除去する主要な経路であり、アテローム性動脈硬化症への治療応用が期待されている。しかし、HDLの「質」であるコレステロール引き抜き活性を制御する因子が明らかとなっていないことが、HDLの治療応用への課題となっている。本研究では、HDLの「質」への影響がほとんど未開拓である、多様なHDL積載タンパク質のうち、どのタンパク質がHDL活性へ寄与するのかを解明する。高密度リポタンパク質（HDL）によるマクロファージからのコレステロール引き抜きを測定する実験系を構築した。更に、HDLに結合するタンパク質 (ApoA-I binding protein：AIBP)がHDLの活性を向上させることを大腸菌を用いたリコンビナントタンパク質を用いて確認した。AIBPがHDLと結合し、活性を向上させるためには細胞外へ分泌される必要がある。そこでAIBP生理機能のさらなる解明のため、AIBP血中量の評価を行った。ヒト血清を用いたEnzyme-linked immune-sorbent assay (ELISA)により、低濃度ながらAIBPがヒト血清中に存在することを明らかとした。また、マウス組織および培養細胞を用いた実験からAIBPの分泌源と思われる臓器を明らかにした。そこで、培養細胞を用いた実験系を用いてAIBPの分泌量が変化する因子を探索したところ、とある生理活性物質の添加が細胞外AIBP量を増加させることが明らかとなった。ヒト血清において、この生理活性物質の血中量とAIBPの血中濃度を比較したところ優位な正の相関を示した。以上よりHDLの活性に寄与するタンパク質であるAIBPの生理的な制御機構を明らかにした。今後、この生理活性物質およびAIBPがアテローム性動脈硬化の進展へどのように寄与するかについて評価を進める。

高密度脂蛋白（HDL）的脂质提取反应是去除周围组织中胆固醇的主要途径，并有望在治疗上应用于动脉粥样硬化。但是，缺乏调节胆固醇戒断活动的明显因素，即HDL的“质量”，这是HDL治疗应用的挑战。这项研究将阐明各种HDL载荷蛋白中的哪种有助于HDL活性，几乎没有影响HDL的质量。构建了一个实验系统，以测量高密度脂蛋白（HDL）从巨噬细胞中抽出胆固醇。此外，使用大肠杆菌使用重组蛋白证实了HDL结合蛋白（APOA-I结合蛋白：AIBP）可改善HDL活性。 AIBP与HDL结合，需要细胞外分泌以改善其活性。因此，为了进一步阐明AIBP生理功能，我们评估了AIBP的血容量。使用人血清的酶联免疫吸附测定法（ELISA）表明，尽管浓度较低，但AIBP仍存在于人血清中。此外，使用小鼠组织和培养细胞的实验表明，器官似乎是AIBP分泌的来源。因此，当我们搜索使用培养细胞使用实验系统改变AIBP分泌量的因素时，据表明，添加某种生理活性物质会增加细胞外AIBP的量。在人血清中，当比较这种生理活性物质的血容量和AIBP的血液浓度时，显示了主要的阳性相关性。从以上，已经阐明了AIBP的生理调节机制，一种有助于HDL活性的蛋白质。将来，我们将继续评估这种生理活性物质和AIBP如何促进动脉粥样硬化的发展。