How angiogenic factor induces immunosuppressive cells to tumor microenvironment

血管生成因子如何诱导免疫抑制细胞进入肿瘤微环境

• 批准号: 22KJ0818
• 负责人: 横田 翔平
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0818/
• 关键词: MDSCs; CX3CL1; VEGF; Canine; Tumor

本研究では犬の移行上皮癌を対象として、細胞株、担癌モデルマウス、腫瘍症例犬を用いて、血管内皮細胞成長因子 (VEGF) とケモカインの一つであるCX3CL1を介した骨髄由来免疫抑制細胞 (MDSCs) の腫瘍内浸潤機構について研究を進めている。研究計画に記載した細胞株を用いた検証は概ね順調に進行している。現在までに、犬の移行上皮癌細胞株がVEGFおよびVEGFの受容体を発現することを確認した。そして、移行上皮癌細胞株にVEGFリコンビナントタンパクを添加すると、CX3CL1のタンパク質発現が上昇することを見出した。この結果から、犬の移行上皮癌では、VEGFによりCX3CL1産生が制御されている可能性が示唆された。また、ゲノム編集により、移行上皮癌細胞株のVEGF受容体およびCX3CL1をノックアウトした細胞株を作製した。今後はこれらのノックアウト細胞株をヌードマウスに移植した担癌モデルマウスを用いて検証を進めていく予定である。大学病院に来院した移行上皮癌症例を用いた検証も進めている。これまでに、健常犬と比較して移行上皮癌症例では尿中のVEGFおよびCX3CL1濃度が上昇していることを見出した。また、免疫組織化学により、CX3CL1は尿中だけでなく腫瘍組織でも高発現しており、発現が高いグループでは予後が有意に悪いことを見出した。これらの結果から、VEGFおよびCX3CL1は細胞株だけでなく、実際の臨床症例のレベルにおいても病態に寄与している可能性が示唆された。今後は担癌モデルマウスを用いた検証を行うと共に腫瘍症例を使用した評価を進めていく。

The aim of this study was to investigate the role of CX3CL1 in the pathogenesis of tumor invasion by bone derived immunosuppressive cells (MDSCs) in canine transitional epithelial carcinoma (TEC), cell lines, tumor-bearing tumors, tumor-bearing canines, and vascular endothelial growth factor (VEGF). The research project documents the use of cell lines in the identification process. Now we confirm the expression of VEGF and VEGF receptors in canine transitional epithelial carcinoma cell lines. The expression of VEGF in CX3CL1 cells was increased. These results suggest the possibility of VEGF expression in CX3CL1 and its inhibition in canine transitional cell carcinoma. The VEGF receptor of transitional epithelial carcinoma cell line and CX3CL1 cell line were prepared. In the future, the cell lines will be transplanted and tested in advance. A case of transitional cell carcinoma in a university hospital is reported. The concentrations of VEGF and CX3CL1 in urine increased in patients with transitional cell carcinoma compared with healthy dogs. CX3CL1 was detected in the urine by immunohistochemistry. These results suggest that VEGF and CX3CL1 may be involved in the development of cell lines and clinical symptoms. In the future, we'll use it to evaluate the disease.