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嗅覚受容体を発現する酵母を用いた乾燥耐性匂いセンサの開発

使用表达嗅觉受体的酵母开发耐干燥气味传感器

基本信息

批准号：
22KJ0996
负责人：
西本和生
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

センサ細胞として用いるために、特定の場所に浮遊細胞である酵母を固定する必要があった。そこで、本年度は①酵母のマイクロ流路への固定法、および、②構築株のコラーゲンゲルアレイへの固定法を検討した。①：3Dプリンタを用いて、PDMS(Polydimethylsiloxane)のモールドを作製した。作製したPDMSを数センチスケールのガラスプレートに接着させ、流路内をコンカナバリンAをコーティング後、酵母を流路内に固定した。固定後、センシング化合物モデルである、酵母フェロモンを溶解した培地を灌流した。灌流後、酵母がフェロモンに反応して形態が変化することを顕微鏡を用いて確認した。その結果、流路内で約7割の酵母のフェロモン応答を確認できた。以上から、酵母のマイクロ流路内への固定と、化合物センシングに成功した。これは、酵母のガラスプレートへの実装にマイクロ流路および、コンカナバリンAが適していることを示している。②：複数種類の酵母細胞をアレイ化した状態で固定するために、ハイドロゲル中への細胞の固定する手法を構築した。PDMS中に3Dプリンタで作製したピラーを埋め込んだデバイスを作製した。ピラーを引いて、コラーゲンゲルを吸引することによって、アレイ化した複数のハイドロゲルを直径約6 mmのスペースに配置することに成功した。さらに、フェロモンに反応してGFPを発現する酵母を固定した後、フェロモンを処理ののち、GFPの発現を確認した。以上から、ハイドロゲルを用いることで、酵母を数ミリスケールの空間に、複数種配置することができる可能性があることを示している。本年度は、研究実施計画の「②酵母のガラスプレートへの実装、最適化」にあたる。本年度の研究成果により、ガラスプレートへの適用には、マイクロ流路、コンカナバリンAが適しており、複数種類の酵母の配置にはハイドロゲルが有用であることがわかった。

The センサcells and として use いるために, and the floating cells and yeast であるyeast in specific places are fixed and necessary があった.そこで, this year's ① yeast のマイクロ flow path への fixation method, および, ②Construction strain のコラーゲンゲルアレイへの fixation method を検した. ①: 3D プリンタを is made of いて and PDMS (Polydimethylsiloxane) のモールドを. Made by PDMS センチスケールのガラスプレートにthenさせ、Stream After the passage of the filter, the yeast is fixed in the flow path. After fixation, the センシング compound モデルである and yeast フェロモンを were dissolved and then perfused in the ground. After perfusion, the yeast reaction morphology was confirmed using a microscopy. As a result, approximately 7% of the yeast in the flow path has been cut and the yeast has been confirmed. Above, the yeast was fixed in the flow path, and the compound was successfully fixed.これは, yeast のガラスプレートへの実装にマイクロ flow path および, コンカナバリンAがAdaptable していることを Show している. ②: Plural types of yeast cells can be fixed in a certain state, and can be constructed using a fixed method of yeast cells in a yeast cell. The 3D ププリンタででしたピラーをbury the め込んだデバイスをした in PDMS.ピラーを cited いて, コラーゲンゲルを attracted することによって, アレイ化したplural のハイドロゲルを diameter is about 6 mmのスペースにconfigurationすることにsuccessした. After さらに, フェロモンにreaction してGFP を発appears する yeast をfixation した, フェロモンを treatment ののち, GFP の発appears をconfirmation した. The above から, ハイドロゲルを use いることで, yeast を number ミリスケールの空The possibility of multiple configurations and multiple configurations is shown. This year, we are researching the implementation plan of "② Yeast Installation and Optimization". This year's research results include: により, ガラスプレートへのapplicable には, マイクロ flow path, and コンカナバリンAがAdaptationしており、Plural types of yeast configurationにはハイドロゲルがare usefulであることがわかった.