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化膿レンサ球菌の表層タンパク質の機能を阻害する阻害剤の探索

寻找抑制化脓性链球菌表面蛋白功能的抑制剂

基本信息

批准号：
22KJ1144
负责人：
山脇つくし
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1144/
关键词：
化膿レンサ球菌糖抗体低分子化合物物理化学

项目摘要

本研究では、化膿レンサ球菌の表層タンパク質の機能を制御する新たな機能阻害分子の開発を目的とする。特に、病原性を引き起こす上で必要不可欠とされている炭水化物の代謝に関わるタンパク質に着目している。1つ目の標的であるマルトデキストリン結合タンパク質SPs0871について、SPs0871特異的に結合しマルトデキストリン獲得を阻害する低分子化合物の探索を行った。前年度までに東京大学創薬機構により構築されている一般化合物を対象としたバーチャルスクリーニングを終えていたため、本年度はそのヒット化合物に対する示差走査蛍光測定DSFと表面プラズモン共鳴SPRを用いたスクリーニングを行い、マルトデキストリン結合との競合が示唆される化合物を1つ取得した。2つ目の標的である糖鎖結合タンパク質SPs1696について、様々なフォーマット・ライブラリーからファージディスプレイ法を用いたセレクションを行うことで、SPs1696に対して高い親和性を持つ抗体を複数取得した。SPs1696をドメイン毎でも発現・精製を行い、表面プラズモン共鳴SPR・等温滴定型カロリメトリーITCを用いて結合確認を行ったところ、ライブラリーによって抗体の結合部位が異なることが明らかとなった。なかでも糖結合ドメインであるCBMに結合する抗体は部分的に糖結合を阻害し、加水分解の効率を落とす様子が確認された。さらにこの抗体について共結晶構造の取得にも成功し、糖結合の阻害メカニズムも明らかとなった。今後はin vivoアッセイの系を構築し、in vitroで機能阻害の見られた抗体が菌体表面環境下においても効果を発揮できるかについて検証する。

In this study, we can control the new machine and prevent the molecule from opening the target drug by using the new machine. It is necessary to pay attention to the disease caused by pathogenicity and pathogeny. 1. The purpose of this study is to detect the inhibition of low molecular weight compounds by combining the combination of SPs0871 and SPs0871 in combination with that of low molecular weight compounds. In the previous year, the government department of Beijing University was responsible for the detection of general compounds. in the previous year, the institutions of Beijing University were responsible for the detection of general compounds. in the previous year, the institutions of Beijing University of Science and Technology, Beijing University, Beijing University and Beijing University. The combination of the compound 1 and the compound 1 was demonstrated by the combination of the compound and the compound. 2. In order to improve the quality of SPs1696, we used the method to obtain the number of copies of antibodies, such as the number of antibodies, the number of antibodies, the number of antibodies and the number of antibodies. The results of the SPs1696 test show that the precision is good, the surface is fine, the SPR isotherm is set, the ITC is confirmed by the combination of the antibody and the antibody, and the combination of the antibody and the antibody is used to confirm the accuracy of the test. The combination of sugar and CBM in the antibody part of the sugar block block and the decomposition rate of adding water is very important to make sure that it is not safe. The results showed that the synthesis of the antibody was successful, and the combination of glucose and glucose was successful. In the future, the in vivo machine will be able to prevent the infection of antibodies in the environment on the surface of the bacteria.