赤血球代替物の非酵素的還元システムに関する研究

红细胞替代品非酶还原体系的研究

基本信息

批准号：
08680940
负责人：
竹岡真司
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では分子集合を利用するヘモグロビン小胞体やリピドヘム小胞体の酸素輸送能力を長時間持続させるために二分子膜を介した電子伝導系を利用するメト化体の非酵素的還元系の実現を目的としている.平成8年度は二分子膜中にユビキノン-10,メチレンブルーを導入,これを電子媒体として外水相に添加した還元剤によるメト化体の還元について検討した.平成9年度では本還元系に大きな影響を及ぼす酵素および活性酸素について,酸素分圧の変化や活性酸素消去酵素を用いて定量的に検討し,効果的な条件設定を行った.1.水相および脂質相の両方に可溶なメチレンブルーを電子媒体としてヘモグロビン小胞体に導入した系では,外水相に添加した水溶性還元剤によって膜を介した電子移動により内水相のメトヘモグロビンが還元された.しかし,酸素分圧の増大と共にメト化率は一度減少した後再び増加する傾向が強く認められ,これはメチレンブルー導入量や外水相還元剤量の増加と共に顕著になり,還元体のロイコメチレンブルーから電子が酸素に移動し,生じた活性酸素が逆にヘモグロビンのメト化を促進した結果であった.このことは活性酸素消去酵素の添加によってメト化体の増加が抑制されることからも確認された.2.1.の結果を受けてメチレンブルーの導入量を12μMの少量とし,水溶性還元剤アスコルビン酸を200μMずつ3回に分けて5時間の間隔で添加することにより,37℃にて40時間経過後もメト化率を10%程度に抑えることができた.本操作を行わない系では同条件で80%以上のメト化の進行が認められた3.亜鉛リピドポルフィリンからの電子受容体への光電子過程に関する基礎知見を得るために,これを溶媒(DMSO)に均一溶解させた場合と二分子膜中に配向させた場合について比較した.均一系ではアルキル鎖が構築する排除体積が電子受容体の接近を妨げている様子が定量的に示すことができた.他方,二分子膜中ではアルキル鎖長がマトリックスのリン脂質アシル鎖長よりも長い系ではむしろ内水相への電子移動過程が容易になることが明確に示され,ポルフィリン環と内外水相との距離が相違することが示唆された.

这项研究旨在实现甲基化体的非酶还原系统，该系统利用双层利用电子电导率系统来确保血红蛋白内质网的氧运输能力和脂质性内质网的氧运输能力，并利用分子组装。在1996年，将泛酮酮-10和亚甲基蓝引入双层，并使用添加到外部水相中的还原剂作为电子培养基来研究甲基甲基体。在1997年，使用氧气压和活性氧消除酶的变化在定量上对对该还原系统产生重大影响的酶和活性氧进行了定量。我们研究并有效地设定了条件。1。在一个系统的系统中，在水性和脂质相中溶于水相和脂质相中的亚甲基蓝被引入血红蛋白内质网中作为电子培养基，通过膜上添加到外部水溶液的外部水质量相位，通过膜通过电子转移来减少内部水相中的甲状腺珠蛋白。但是，随着氧气二压的增加，有很强的趋势减少一次，然后再次增加。这变得更加明显，随着引入亚甲基蓝的含量的增加以及外部水相还原剂的量，并将电子从还原体的白细胞甲基蓝转移至氧气，从而形成了活性氧。相反，促进了血红蛋白的甲基化。通过添加活跃的氧气消除酶抑制甲基化的增加，这证实了这一点。为了响应2.1的结果，引入的甲基蓝色的量为12μm，在5小时时，在200μm的200μm中，将水溶性还原剂抗坏血酸在三个部分中添加，即使在37°C下，甲基化速率即使在40小时后也可以降低至约10％。在没有此过程的系统中，甲基化在相同条件下的80％或更多。3。锌脂源性锌锌从电子受体那里获得有关电子受体的基本知识，我们比较了光电子过程均匀地溶解在溶剂（DMSO）中的情况下，并且在近层膜中所构建的排除式构建的型号的构建型链中的溶液膜中的方向的情况下，该型号的构成了Alkyl offer nobere nobere the Alkyl sonsem prever prever prevertion inkyl offerement。另一方面，清楚地表明，在烷基链长度长于基质的磷脂酰基链长度的系统中，电子转移过程更容易，这表明卟啉环与内水相之间的距离差异。