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蚊特異的フラビウイルスを利用した病原性フラビウイルスにおける宿主特異性機構の解明

利用蚊子特异性黄病毒阐明致病性黄病毒的宿主特异性机制

基本信息

批准号：
22KJ0133
负责人：
小林広子
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

蚊媒介性フラビウイルスは、日本脳炎ウイルス（JEV）やデングウイルス（DENV）等の脊椎動物にも感染性を有する病原性フラビウイルスと、蚊のみで感染が成立するとされている蚊特異的フラビウイルスに分類される。蚊特異的フラビウイルスと病原性フラビウイルスは遺伝的には近縁であるが、宿主特異性の違いに関わる機構は、ほとんど明らかとなっていない。本研究課題「蚊特異的フラビウイルスを利用した病原性フラビウイルスにおける宿主特異性機構の解明」では、脊椎動物に感染が成立する日本脳炎ウイルス（JEV）と、蚊特異的フラビウイルスであるバルケジライクウイルス（BJLV）の相同領域組換えウイルスを作出し、その性状を野生型ウイルスと比較解析することで、フラビウイルスの宿主特異性に寄与するウイルス因子を探索する。2022年度は、構造タンパク質prM、およびEの相同領域を置換したキメラウイルスの作成に成功し、キメラウイルスの宿主特異性を評価した。その結果、BJLVの構造タンパク質prMEは、哺乳類細胞において、蚊由来培養細胞と同様に培養温度依存的に侵入過程において機能することが明らかになった。細胞培養温度がウイルスの動態に影響することが判明した為、複数の蚊特異的フラビウイルスを対象に、蚊由来培養細胞を用いて、哺乳類動物細胞の培養温度条件で増殖できる温度順化ウイルス株の取得を開始した。また、BJLVの非構造タンパク質や非翻訳領域に関して、哺乳類細胞における複製への影響を調べるために、それらの領域の組換えウイルスの作出を試みたが、CPER法でのキメラウイルスの作成は困難であった。そこで、JEVとBJLVに関して、構造タンパク質領域をルシフェラーゼ遺伝子に置換したレプリコンアッセイの構築を開始し、構造タンパク質以外の領域に関して宿主特異性を検証する。

Mosquito-borne animals such as mosquito-borne virus, Japanese inflammatory virus (JEV), infectious disease (DENV), and other spinal animals have pathogenicity, mosquito infection, mosquito infection, and mosquito-specific mosquito infection. Mosquito-specific pathogens are known to be pathogenic, host-specific, host-specific, and host-specific. In this study, mosquito-specific mosquitoes were identified by pathogen-specific host-specific mechanisms, spinal infection caused by inflammatory disease in Japan (JEV), mosquito-specific infectious diseases (BJLV) in the same field. The characters of wild type, wild type and wild type. In the year 2022, in the same field, in the same field. According to the results of the experiment, BJLV has established the induction prME, mammalian cell culture and mosquito cell culture. The temperature-dependent invasion process of mosquito culture can improve the performance of cell culture. Cell culture, temperature monitoring, cell culture, cell culture, temperature culture, temperature culture, cell culture, temperature culture, cell culture, temperature culture For example, in the field of information technology, in the field of non-information technology, in the field of breast cancer, in the field of breast cancer, in the field of medicine, in the field of BJLV, in the field, and in the field. The information, JEV, BJLV, and other information systems are required to be used in the field of health care. This is the beginning of the operation, and the creation of a special host information system outside the field of information.