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腸管寄生病原アメーバにおける宿主特異性関連因子の解明

肠道寄生病原体阿米巴宿主特异性相关因素的阐明

基本信息

批准号：
20H03482
负责人：
橘裕司
金额：
$ 11.23万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

マカク属のサルを自然宿主とする腸管寄生病原アメーバEntamoeba nuttalliにおいて、ゲノム解析に基づき、プロリン・トレオニンリッチな8アミノ酸[G,E]KPTDTPSの42回反復を含む種特異的なタンパク質（PTORS）を同定した。昨年度にE. nuttalli標準株のPTORSを大腸菌で調製し、それに対して特異的に反応する6クローンのマウスモノクローナル抗体を作製している。これまでに大腸菌で調製したのは全長タンパク質であったので、反復配列を含まないN末端側断片、反復配列部分を含むC末端側断片、反復配列のみのタンパク質断片を調製し、モノクローナル抗体の反応性を比較した。その結果、いずれの抗体が認識するエピトープも反復配列領域に局在することが確認された。国内外のE. nuttalli分離株について抗体の反応性を調べた結果、ウェスタンブロット解析で検出されるバンドサイズの異なる株も存在した。これらの分離株について、全長のタンパク質をコードする遺伝子を増幅し、予想されるアミノ酸配列を解析した。その結果、反復配列を除くN末端側とC末端側の配列においては差がないものの、反復回数が48回の株も存在した。また、同じ反復回数でも、GKPTDTPSとEKPTDTPSの2つのモチーフの出現パターンが異なり、PTORSに多型性のあることが確認された。この他、これまで調査が実施できていなかったタイ東部において、カニクイザルの糞便を収集して解析し、E. nuttalliの高い感染率を確認した。

Entamoeba nuttalli, Entamoeba nuttalli. Last year, E. PTORS of nuttalli standard strain is modulated and produced in response to specific reactions. Here, Escherichia coli is modulated to include the full-length cDNA fragment, the repeatedly arranged portion includes the N-terminal fragment, the repeatedly arranged portion includes the C-terminal fragment, and the repeatedly arranged mid-cDNA fragment, and the reactivity of the monoclonal antibody is compared. The results showed that the antibody was recognized in the field of repeated alignment. E. Nuttalli isolates are resistant to antibodies, and the results of their analysis show that there are differences in the presence of these strains. These isolates were isolated from a variety of plants, including plants, plants, and plants. As a result, the number of repeated arrangements is 48, except for the N-terminal and C-terminal arrangements. The number of repeat cycles, GKPTDTPS and EKPTDTPS are different, and the polymorphism of PTORS is confirmed. The investigation was carried out in the eastern part of the country and the feces collected in the eastern part of the country were analyzed. Nuttalli's high infection rate confirmed