転写因子E1AFのがん細胞の浸潤活性の発現と細胞周期における役割

转录因子E1AF在癌细胞侵袭活性和细胞周期中的作用

• 批准号: 09671916
• 负责人: 小野 貢伸
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09671916/
• 关键词: 転写因子; がん細胞浸潤; MMP; 細胞周期調節; p21^<waf1; cip1>; E1AF; 細胞周期; がん細胞; 細胞同期

E1AFはHigashinoらによって発見されたets-oncogene familyに属する転写困子で、種々の遺伝子の転写に関与することが示唆されている。われわれはE1AFが細胞外基質(ECM)の分解酵素であるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)l,3,9の転写を亢進させることをCAT assayにより示した。また、口腔扁平上皮癌由来細胞株をコラーゲンゲル上で三次元培養(Raft culture)することでin vitroでの浸潤モデルを作製し、浸潤性に増殖する癌細胞ではMMPl,9の発現がみられ、この様な腫瘍細胞の浸潤性増殖はE1AFによるMMP遺伝子の転写亢進によることを報告した。今回の検索ではウイルスペクターを用いてE1AFの発現を誘導し、転写因子E1AFがどの様な機構で浸潤性増殖に関与しているかを直接的に探ることを目的とした。E1AF発現ベクターをHSC3に遺伝子導入し、E1AF発現HSC3(HSC3DOLF)を確立した。HSC3は浸潤性の増殖を示す口腔扁平上皮癌由来細胞であり、MMP-9およびE1AFが強く発現していることが報告されている。今回、このHSC3にE1AF発現遺伝子を導入し、E1AFをさらに強制発現させた。その結果、メッセージレベル・タンパクレベルの検索から、MMP-9の発現がさらに強くみられるようになり、同時にp21^<waf1/cip1>も発現していることが明らかになった。またヌードマウス舌に移植した腫瘍の組織学的検索からも、E1AFが腫瘍の増殖を抑制していることが示唆された。このことから、E1AFがp21^<waf1/cip1>遺伝子の転写活性化を介して細胞周期を制御している可能性が考えられた。腫瘍細胞の悪性度の指標となる浸潤能と増殖能は、パラレルな関係にあると考えられるが、今回の結果から、腫瘍細胞の浸潤能と増殖能の発現は異なった細胞周期において生じている可能性があることが示された。

E1AF is a member of the Higashino family and a member of the ets-oncogene family. E1AF is a catabolic enzyme of extracellular matrix (ECM). It is expressed in the CAT assay today. In addition, cell lines derived from oral squamous epithelial carcinoma (OSCC) were cultured in vitro to inhibit invasion and proliferation of MMP 1,9. The development of MMP 1,9 and the proliferation of MMP 1,9 were reported. This paper discusses how to use E1AF to induce the occurrence of invasive growth and how to use E1AF to directly detect the occurrence of invasive growth. E1AF occurrence HSC3 gene introduction, E1AF occurrence HSC3(HSC3DOLF) establishment HSC3 invasion and proliferation of squamous cell carcinoma of the oral cavity, MMP-9 and E1AF are strongly detected in the oral cavity. This time, HSC3 E1AF discovery vector was introduced and E1AF discovery was forced. The results of the study, the detection of MMP-9, the occurrence of MMP-9, and the simultaneous occurrence of p21^<waf1/cip1>. Histological examination of the tumor and its growth inhibition by E1AF The possibility of cell cycle regulation by gene activation of E1AF gene p21 is examined. The index of tumor cell's invasion ability and proliferation ability is different from the index of tumor cell's invasion ability.

项目成果

堀向弘眞: "肝細胞増殖因子(HGF)刺激における口腔偏平上皮がんの浸潤性におよぼすetsがん遺伝子群転写因子E1AFの役割"北海道歯誌. 20. 167-175 (1999)

Hiromasa Horimuka：“et癌基因组转录因子E1AF对肝细胞生长因子（HGF）刺激的口腔鳞状细胞癌侵袭性的作用”《北海道牙科杂志》20. 167-175（1999）。

Shindoh M. et al: "BAG-l expression correlates highly with the malignant potential in early lesion (T1 and T2) of oral squamous cell carcinoma"Oral Oncol.. (印刷中). (2000)

Shindoh M.等人：“BAG-1表达与口腔鳞状细胞癌早期病变（T1和T2）的恶性潜能高度相关”Oral Oncol（2000年出版）。