ディファレンシャルディスプレー法による膵癌肝転移遺伝子の同定と予後診断の臨床応用

差异显示法鉴定胰腺癌肝转移基因及预后临床应用

• 批准号: 09671327
• 负责人: 竹山 廣光
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09671327/
• 关键词: 膵癌; 肝転移; differential display; IL-1α; 転移; Differential Display法

膵癌は最も予後の悪い癌の一つであり,特に肝転移は重要な予後因子である.そこで,複数のヒト膵癌培養細胞株を肝転移群と非肝転移群に分け,両者のmRNA発現の差異をdifferential display法(以下DD法)にて解析し,転移に関連する遺伝子の同定を試みた.その結果(1)ヒト膵癌培養細胞株の肝転移能をヌードマウスの経脾肝転移モデルで,AsPc-1,BxPc-3,SW1990は肝転移能を有し,Capan-2,PaCa-2は肝転移能を有しなかった.(2)DD法を肝転移群(BxPc-3,SW1990)と非転移群(Capan-2,PaCa-2)の間で施行し,転移群にだけ発現したバンドより,Interleukin-1α(IL-1α)の3'末端のDNA flagmetが検出された.(3)ヒト膵癌,胃癌,大腸癌培養細胞株にてIL-1αのmRNA発現をRT-PCRにて確認したところ,ヌードマウスでの経脾肝転移能とIL-1αのmRNA発現が一致した.(4)IL-1β,IL-1レセプターtype I,type IIまた,他の消化器癌にて浸潤,転移に関連するとされるmatrix metalloproteinase-2(MMP-2)およびMMP-9のRT-PCRによる発現の有無を検討したが,転移能とは一致していなかった.(5)SW1990,PaCa-2の浸潤能をマトリゲルを用いて測定,抗ヒトIL-1α(poly)抗体を添加し浸潤能への影響を観察すると,抗体無添加では両者の浸潤能に有意な差は認められなかったが,抗体を添加すると,SW1990では抗体濃度依存性に浸潤能が減少し,PaCa-2に於ては抗体の影響は認められなかった.以上より,肝転移能にIL-1αの発現が関与している可能性が示唆された.また,転移能を有するSW1990細胞株に於てはその浸潤能にIL-1αの関与が示唆された.

Cancer is the most common cause of cancer, especially liver metastasis is an important cause. In addition, the differential display method (DD method) was used to analyze the differences in mRNA expression between liver metastasis and non-liver metastasis of multiple cultured cancer cell lines. Results (1) The liver migration of human cancer cell line AsPc-1,BxPc-3, SW1990,Capan-2,PaCa-2 was detected. (2)DD The DNA flagmet at the 3'end of Interleukin-1α(IL-1α) was detected during the transition between BxPc-3 (SW1990) and Capan-2 (PaCa-2). (3)The mRNA expression of IL-1 α was confirmed by RT-PCR in cultured human gastric, colorectal and gastric cancer cell lines. (4)IL-1β,IL-1 β, IL- (5)SW1990,PaCa-2 infiltration energy was measured in the middle of the test, anti-IL-1α(poly) antibody added to the effect of infiltration energy was observed, antibody did not add anti-IL-1α(poly) antibody to the effect of infiltration energy was intentionally different, antibody added,SW1990 antibody concentration dependent infiltration energy decreased,PaCa-2 in the effect of antibody was observed. Therefore, the possibility of IL-1α expression in liver metastasis is suggested. SW1990 cell line has the ability to transfer IL-1α and to express IL-1α.