自己細胞を用いた心臓再生への挑戦

使用自体细胞对心脏再生的挑战

• 批准号: 22K19521
• 负责人: 柴 祐司
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19521/
• 关键词: iPS細胞

１）カニクイザルiPS細胞由来心筋細胞の作製とレシピエントカニクイザルの同定フィリピン産カニクイザル5頭から、皮膚組織由来線維芽細胞に対して、エピゾーマルベクターを用いてOct3/4、Sox2、Klf4、L-Mycを遺伝子導入することによりiPS細胞を5系統作製した。未分化iPS細胞に対して、アクチビンA、BMP４を加えることにより、レシピエト1頭当たり2×10^8個の心筋細胞を3頭分作製し、凍結保存した。またレシピエントカニクイザルについて、MHC型同定を行い、15頭確保した。２）霊長類前臨床移植試験レシピエント動物に対して、全身麻酔下で開胸し、左冠動脈前下行枝中部で血流を遮断し、3時間後に再灌流することにより心筋梗塞モデル（ischemia/reperfusion injury）を作製する。心筋梗塞作製12週間後の慢性期に、自家移植（N=2）を行った。4週間後の組織解析では、グラフト心筋に対する炎症細胞浸潤が見られた。自己細胞移植においても、一定程度免疫応答が誘発されることが示され、少量の免疫抑制剤を併用して移植試験を再開することとした。

1）制备源自cynomolgus猴子的心肌细胞，并鉴定来自菲律宾的五个cynomolgus猴子的受试者cynomolgus猴子，通过使用Epiz Skinom Tissom的fibroblasts将OCT3/4，SOX2，KLF4和L-Myc fibroblasts转移oct3/4，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2，SOX2/4，使用五个IPS细胞。将激活素A和BMP4添加到未分化的IPS细胞中，以每种食谱产生3个心肌细胞2×10^8，并存储在冷冻保存中。此外，确定了接受者cynomolgus猴子的MHC类型，并确保了15种。 2）临床前灵长类动物移植试验：心肌梗死模型（缺血/再灌注损伤）是通过在全身麻醉下打开胸腔而产生的，从而阻止了左前降冠状动脉中间的血液流动，3小时后再灌注。自体移植（n = 2）在产生心肌梗塞后12周在慢性期进行。在4周后的组织分析中，观察到炎症细胞浸润到移植的心肌中。结果表明，在自体细胞移植中在一定程度上引起了免疫反应，并使用少量的免疫抑制剂恢复移植试验。