長鎖非翻訳RNAを標的とする変異KRAS肺癌の合成致死治療の開発

変異KRASは肺癌において最も高頻度のドライバー癌遺伝子である。しかし、EGFR変異などに対する分子標的治療薬と同程度の効果を示す薬剤の開発には至っていない。変異KRAS肺癌に対する治療薬開発のアプローチとして、合成致死が期待されてきたが、複数の研究が変異KRAS癌の合成致死遺伝子存在の可能性は低いことを示唆した。そこで、本課題はKRAS癌の合成致死の標的分子として非翻訳RNAの一つである長鎖非翻訳RNA（long non-cording RNA ; lncRNA）に着目した。本課題は、研究代表者が開発した不死化正常ヒト気管支上皮細胞モデルHBECを用いて、変異KRAS肺癌の合成致死標的となるlncRNAを同定する。さらにその機能を解明し、lncRNAを標的とする変異KRAS肺癌に対する合成致死治療薬の開発を目指す。一般的に使用されるウイルスベクターはlncRNAの二次構造を変化させ、機能を損なうことが報告された。近年この問題を克服したELECTSベクターが開発された。我々は、開発者から癌促進的なlncRNAとして報告されている2種類のlncRNAが組み込まれた発現ベクターの供与を受け、HBEC細胞および肺癌細胞に導入した。およそ20倍程度の発現増加が得られたが増殖は不変であった。今後はトランスフェクション条件の最適化により発現量を増加させ、最終的には両lncRNAの過剰発現細胞における癌促進作用の証明を目指す。また。不死化正常気管支上皮細胞HBEC3-RIN2細胞において変異KRAS発現を誘導し、続いて、次世代シークエンス解析を実施した。その結果、変異KRAS発現により発現が増加するlncRNAを複数同定した。lncRNAのノックダウン実験にはRNA干渉よりもアンチセンスがより優れることが示唆されているため、アンチセンスによる同定lncRNAの個別ノックダウンを行う。

変異KRASは肺癌において最も高頻度のドライバー癌遺伝子である。しかし、EGFR変異などに対する分子標的治療薬と同程度の効果を示す薬剤の開発には至っていない。変異KRAS肺癌に対する治療薬開発のアプローチとして、合成致死が期待されてきたが、複数の研究が変異KRAS癌の合成致死遺伝子存在の可能性は低いことを示唆した。そこで、本課題はKRAS癌の合成致死の標的分子として非翻訳RNAの一つである長鎖非翻訳RNA（long non-cording RNA ; lncRNA）に着目した。本課題は、研究代表者が開発した不死化正常ヒト気管支上皮細胞モデルHBECを用いて、変異KRAS肺癌の合成致死標的となるlncRNAを同定する。さらにその機能を解明し、lncRNAを標的とする変異KRAS肺癌に対する合成致死治療薬の開発を目指す。一般的に使用されるウイルスベクターはlncRNAの二次構造を変化させ、機能を損なうことが報告された。近年この問題を克服したELECTSベクターが開発された。我々は、開発者から癌促進的なlncRNAとして報告されている2種類のlncRNAが組み込まれた発現ベクターの供与を受け、HBEC細胞および肺癌細胞に導入した。およそ20倍程度の発現増加が得られたが増殖は不変であった。今後はトランスフェクション条件の最適化により発現量を増加させ、最終的には両lncRNAの過剰発現細胞における癌促進作用の証明を目指す。また。不死化正常気管支上皮細胞HBEC3-RIN2細胞において変異KRAS発現を誘導し、続いて、次世代シークエンス解析を実施した。その結果、変異KRAS発現により発現が増加するlncRNAを複数同定した。lncRNAのノックダウン実験にはRNA干渉よりもアンチセンスがより優れることが示唆されているため、アンチセンスによる同定lncRNAの個別ノックダウンを行う。