シングルセルレベルで微小環境から探る子宮筋腫の発育とその多様性のメカニズムの解明

从单细胞水平的微环境探索子宫肌瘤生长的机制及其多样性

• 批准号: 22K19603
• 负责人: 杉野 法広
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19603/
• 关键词: 子宮筋腫; シングルセル解析; 微小環境; MED12変異

子宮筋腫は女性ホルモンにより発育するが、その反応性、腫瘍の大きさ、構成する細胞・組織には多様性（個人差）がある。また、ドライバー変異であるMED12変異の有無により2つの筋腫サブタイプ（MED12変異を有するMED12（＋）筋腫と有しないMED12（－）筋腫）が存在する。子宮筋腫では主となる平滑筋細胞の他に線維芽細胞、免疫細胞や膠原線維等により微小環境が形成されている。この微小環境における細胞間の相互作用が子宮筋腫の多様性に寄与すると考えられるため、これまでのバルクレベルでの解析ではその多様性の本質に迫ることは難しい。そこで本研究では、シングルセルレベルでの解析により子宮筋腫の発育と多様性のメカニズムを微小環境を構成する細胞の細胞間相互作用を通して解明することを目的とした。そのため、まず「1．MED12（＋）と（－）筋腫検体においてシングルセルRNA sequencingにより子宮筋腫の微小環境を構成する細胞集団を同定」し、さらに「2．異種移植 (Patient-derived xenograft：PDX) モデルを用いて筋腫の発育に伴う微小環境を構成する細胞集団の変化を調べ、発育に最も関与する細胞集団を同定」する。本年度は，上記研究項目1．については，シングルセルRNA sequencingにおいて実験の鍵となる子宮筋腫組織の単一細胞への分散法の確立を試みた。研究項目2．については，子宮筋腫の発育を再現できる現在唯一の実験系である異種移植モデルを確立し、筋腫細胞を重度免疫不全マウスの腎被膜下に移植することで筋腫様の腫瘤が再現性高く形成されることを確認した。

子宫肌瘤是由雌激素开发的，但其反应性，肿瘤大小以及构成细胞和组织的细胞和组织的多样性（个体变化）。此外，取决于是否存在驱动器突变，MED12突变，有两个肌瘤亚型（具有MED12突变的Med12（+）肌瘤和没有MED12的MED12（ - ）肌瘤。在子宫肌瘤中，除主要平滑肌细胞外，还由成纤维细胞，免疫细胞，胶原蛋白原纤维等形成微环境。由于人们认为这种微环境中的细胞 - 细胞相互作用有助于子宫肌瘤的多样性，因此很难通过以前的体积分析来达到这种多样性的本质。因此，这项研究旨在通过细胞的细胞相互作用来阐明子宫肌瘤发育和多样性的机制，这些细胞相互作用通过在单细胞水平上分析来构成微环境。因此，首先，“ 1。通过单细胞RNA测序在Med12（+）和（ - ）肌瘤样本中识别构成子宫肌瘤微环境的细胞群体，并“确定细胞群”，这些细胞群可以使用Xenograft（pdxenograft）的模型（PDXENOGRAFT）构成细胞的微观环境，以调查Xenograft（pdx）模型的细胞。肌瘤随着它们的发展而进行微环境，并确定最涉及发育的细胞群体。”今年，上述研究项目1是1。因此，我们试图建立一种将子宫肌瘤组织分散到单个细胞中的方法，这是单细胞RNA测序中实验的关键。研究项目2。关于这一点，我们建立了一个异种移植模型，该模型目前是唯一可以复制子宫肌瘤发育的实验系统，并确认可以通过在严重免疫缺陷型小鼠的肾胶囊下植入肌瘤细胞来形成肌瘤样肿块。

项目成果

Different transcriptome profiles and histological features in uterine fibroids with and without MED12 mutations.

具有和不具有 MED12 突变的子宫肌瘤的不同转录组谱和组织学特征。

• 发表时间: 2023
• 作者: Tamehisa T;Maekawa R;Sato S;Sakai T;Tamura I;Sugino N
• 通讯作者: Sugino N