Challenge to elucidate the mechanism of cleft palate development from gene expression analysis linked to spatial information
从与空间信息相关的基因表达分析阐明腭裂发育机制的挑战
基本信息
- 批准号:22K19624
- 负责人:
- 金额:$ 4.16万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-06-30 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究目的である、口蓋発生メカニズムの解明のため、口蓋突起癒合部におけるFillamin A (Flna)の発現に注目し、主に次の4項目の研究を実施した。一つ目は、マウス胎児口蓋の培養法を用いた器官培養実験であり、口蓋突起部上皮消失の重要な因子であるTGF-βとFlnaとの関係を検討した。具体的にはTGF-β阻害薬およびTGF-βの下流で活性化するRhoA阻害薬、さらに、siRNAを用いたFlnaのノックダウンを行い、器官培養中の口蓋での反応を観察した。この結果、TGF-β阻害薬およびRhoA阻害薬を添加した口蓋では、Flnaタンパクの産生が著しく低下していた。これらのことからFlnaは既報のTGF-βやRhoAシグナルの下流で働いていることが示唆された。二つ目は、上記の器官培養法で得られた上記の結果をより詳細に調べるため、ヒト表皮角化細胞であるHaCat細胞を用いてTGF-β経路下流で発現するFlnaと上皮間葉転換についてin vitro実験を行なった。この結果の解釈に関しては追加で実験を行う必要があると考えられる。三つ目は、遺伝子改変マウスの作成である。上皮細胞特異的にFlnaをノックダウンさせるため、KRT14-CreマウスとFlna floxマウスをどちらもJackson Laboratoryから購入した。凍結胚からそれぞれの遺伝子改変マウスを作出し、現在交配を続けている。現段階で交配に問題は認められず、約3か月程度で目的のマウスが得られる予定である。また、四つ目としてNanostring社のGeoMXを用いた空間的トランスクリプトーム解析を行うための準備実験を行なった。本研究の予備実験として既にVisiumを用いたトランスクリプトーム解析を行なっているが、Flnaに特化した更なる解析を予定している。
The purpose of this study で あ る, flap 発 raw メ カ ニ ズ ム の interpret の た め, flap swelled healing に お け る Fillamin A (Flna) の 発 に attention し, master に の 4 items の research を be applied し た. A つ は, マ ウ ス tire where flap の culture method を with い た organ culture be 験 で あ り, flap lug boss epithelium disappeared の important factor な で あ る TGF - beta と Flna と の masato is を beg し 検 た. Specific に は TGF - beta resistance against 薬 お よ び TGF - beta の obscene で activeness す る RhoA resistance against 薬, さ ら に, siRNA を with い た Flna の ノ ッ ク ダ ウ ン を line い, organ cultures の flap で の anti 応 を 観 examine し た. こ の results, TGF - beta resistance against 薬 お よ び RhoA resistance against 薬 を add し た flap で は, Flna タ ン パ ク の have が し く low し て い た. こ れ ら の こ と か ら Flna は at both の TGF - beta や RhoA シ グ ナ ル の obscene で 働 い て い る こ と が in stopping さ れ た. Two つ は, written の organ culture method to で ら れ た written の results を よ り detailed に adjustable べ る た め, ヒ ト epidermal keratinocytes で あ る HaCat cells を using い て TGF - beta 経 way obscene で 発 now す る Flna と epithelial mesenchymal planning in に つ い て in vitro be 験 を line な っ た. The <s:1> result <e:1> is related to に and て. Additionally, で practical experience を and う are necessary for があると examination えられる. The three subheadings of ウス and 伝 are modified to form である. Epithelial cells specific に Flna を ノ ッ ク ダ ウ ン さ せ る た め, KRT14 - Cre マ ウ ス と Flna flox マ ウ ス を ど ち ら も Jackson Laboratory か ら buy し た. The 伝 offspring of the frozen embryo are transformed into ウスを ウスを to produce <s:1>, and now they mate を続けて る る. The current stage で mating に problem に is found to be められず, to a degree of about 3 months で, and the objective is that られる is determined to である. ま た, four つ mesh と し て Nanostring club の GeoMX を with い た space ト ラ ン ス ク リ プ ト ー ム parsing line を う た め の ready to be 験 を line な っ た. の this study to be prepared 験 と し て both に Visium を with い た ト ラ ン ス ク リ プ ト ー ム parsing line を な っ て い る が, Flna に specialized し た more な る parsing を designated し て い る.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Filamin A mediated epithelial-mesenchymal transition during embryonic palate development
胚胎腭发育过程中细丝蛋白 A 介导的上皮-间质转化
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:王 紫儀;早野 暁;上岡 寛
- 通讯作者:上岡 寛
口蓋突起の癒合におけるTGF-Beta3依存性Filamin Aを介した上皮間葉転換:バイオインフォマティクスに基づく研究
腭突融合中TGF-Beta3依赖性Filamin A介导的上皮-间质转化:一项基于生物信息学的研究
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:早野 暁;王 紫儀;永田 倭代;上岡 寛
- 通讯作者:上岡 寛
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上岡 寛其他文献
骨細胞における機械的刺激への応答能について
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- DOI:
- 发表时间:
2007 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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松本卓也
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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宮崎 佳奈子,吉崎 恵悟,傅 堯,鮒田 啓太,湯田 智美,田 甜,水田 敢士,川原 純平,花田 彩圭,高橋 一郎
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- DOI:
- 发表时间:
2018 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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原徹
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- 批准号:
23K27804 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 4.16万 - 项目类别:
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