Elucidation and utilization of the digestive ability of Green turtles

岩手県大槌町の混獲による死亡個体5頭（うち4頭は一旦凍結）、沖縄県竹富町黒島の混獲死亡個体３頭の剖検時に腸管内容物を嫌気ポーターおよびBHIあるいはmGAM液体培地中に採取し中部大学に冷蔵状態で搬送した。加えて沖縄県美ら海水族館にて保護中の野生アオウミガメ3頭から新鮮糞便を嫌気ポーターに採取し、同様に冷蔵状態で中部大学に輸送した。嫌気ポーター内の試料を希釈した後、EG血液寒天平板、BL血液寒天平板、GAM寒天平板、MRS寒天平板に塗抹し、30℃の嫌気状態で培養した。発育したコロニーを単離し、16S rRNA遺伝子のPCR増幅とシーケンスによって同定を行った。分離されたアオウミガメ腸内細菌のうち合計で193株を同定したが、そのうち88株はVibrio属、Photobacterium属、Lactiplantibacillus属、Lactococcus属などの酸素耐性をもつ通性嫌気性細菌で、残り105株はCLostridium属、Bacteroides属、Eubacterium属、など絶対嫌気性菌であった。このうち16S rRNAシーケンスの一致度が90%前後のものが7株含まれており、これらは未知の細菌種である可能性が高いと思われる。哺乳類では腸内で多様な多糖の分解に働くとされるBacterides fragilis　B.cellulosilyticus Clostridium butyricum, Oscillibacter ruminantium, Eubacterium limosumなどが大槌町10月捕獲個体および沖縄美ら海水族館保護個体から分離されたほか、193株以外に同定作業が完了していないもののうちに強い寒天分解性を示す細菌も複数株得られている。これらの細菌は、アオウミガメの消化に貢献していると想定されるため、今後詳細検討を進める予定である。

岩手県大槌町の混獲による死亡個体5頭（うち4頭は一旦凍結）、沖縄県竹富町黒島の混獲死亡個体３頭の剖検時に腸管内容物を嫌気ポーターおよびBHIあるいはmGAM液体培地中に採取し中部大学に冷蔵状態で搬送した。加えて沖縄県美ら海水族館にて保護中の野生アオウミガメ3頭から新鮮糞便を嫌気ポーターに採取し、同様に冷蔵状態で中部大学に輸送した。嫌気ポーター内の試料を希釈した後、EG血液寒天平板、BL血液寒天平板、GAM寒天平板、MRS寒天平板に塗抹し、30℃の嫌気状態で培養した。発育したコロニーを単離し、16S rRNA遺伝子のPCR増幅とシーケンスによって同定を行った。分離されたアオウミガメ腸内細菌のうち合計で193株を同定したが、そのうち88株はVibrio属、Photobacterium属、Lactiplantibacillus属、Lactococcus属などの酸素耐性をもつ通性嫌気性細菌で、残り105株はCLostridium属、Bacteroides属、Eubacterium属、など絶対嫌気性菌であった。このうち16S rRNAシーケンスの一致度が90%前後のものが7株含まれており、これらは未知の細菌種である可能性が高いと思われる。哺乳類では腸内で多様な多糖の分解に働くとされるBacterides fragilis　B.cellulosilyticus Clostridium butyricum, Oscillibacter ruminantium, Eubacterium limosumなどが大槌町10月捕獲個体および沖縄美ら海水族館保護個体から分離されたほか、193株以外に同定作業が完了していないもののうちに強い寒天分解性を示す細菌も複数株得られている。これらの細菌は、アオウミガメの消化に貢献していると想定されるため、今後詳細検討を進める予定である。