細胞性粘菌の分岐構造の形成に関与する遺伝子のクローン化とその解析

网柄菌分支结构形成相关基因的克隆与分析

• 批准号: 09640786
• 负责人: 田仲 可昌
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09640786/
• 关键词: 細胞性粘菌; 形態形成; Polyshondylium pallidum; p24 family; 小胞輸送; 押入突然変異; Polysphondylium pallidum; insertional mutagenesis; gene tagging; morphogenesis; development; fruiting body

細胞性粘菌Polysphondylium palliumの子実体は、主軸上に輪生した分枝をだして、枝分かれした構造を形成する。我々は、この分枝構造に注目し、この構造が、どのような分子的基礎のもとに、どのような遺伝子産物が、どのような機構で形成されるかについて明らかにすることを目的とした。まず、この生物で挿入突然変異作製法を確立した。次に、この方法を用いて、多数の形態異常の変異体を単離した。その中の1つに、分岐した枝の長さが長い変異株があり、この株の変異遺伝子のクローン化を試みた。挿入されたベクターDNAを目印にして、その付近のゲノムDNAをクローン化し、1個のORFを見つけた。この変異が、このORFをコードする遺伝子によって引き起こされたことを相同組換え法を用いて確認した。また、cDNAを解析することにより、この遺伝子は2個のイントロンを含むことを明らかにした。相同性検索やアミノ酸配列の比較、また膜貫通ドメインの存在とその位置により、この遺伝子にコードされたタンパク質は、分泌タンパク質の小胞輸送に関与しているp24タンパク質ファミリーに属することが分かった。また、ノーザンブロット解析から、この遺伝子は発生開始後8時間目に発現量が最大に達して、その後減少していくことと、変異株ではこのmRNAは全く発現しないことが明らかになった。また、この遺伝子はゲノム中に1コピー存在していた。細胞性粘菌Dicytostelium discoideumのEST中に、3個のホモログを見つけたので、それらの遺伝子のゲノムDNAの塩基配列とcDNAの塩基配列を決定した。

The body of Polysphondylium pallium cell slime mold, the growth of branches and the formation of branches on the main body. Our branches and branches are responsible for the production of attention, information, basic information of the molecules, the equipment of the equipment, and the mechanical structure of the equipment. All of a sudden, you have to make sure that your life is established. The second and second methods are used, and most of them are often separated from each other. In the middle of the experiment, the bifurcation branch is long, the tree is not, and the tree is not. Enter the DNA directory, pay the price close to the DNA directory, and install one ORF directory. Please use the same method to confirm that you are using the same method to verify that you are not allowed to do so. You can use the same method to confirm that you are using the same method. The two models, namely, cDNA and, contain information and information about each of the two sub-systems. In the same way, there is a difference between the position of the membrane and the location of the homologue, the location of the membrane, the location of the membrane, the location of the cell, the position of the cell, the location of the cell, the cell and the cell. This is the first time that the maximum volume has been reached at 8: 00 after the start of life, and that the maximum volume has reached at 8: 00 after the start of life, and that the maximum volume has reached at 8: 00 after the start of the study. after that, there will be a small number of mRNA after the start of the year, and the temperature of the plant will be fully available. No, no. The cell slime fungus Dicytostelium discoideum EST, three taxa, and the other two were selected for the determination of the cDNA base configuration in the cDNA base column.