Development of an artificial liposome to detect exosome markers in wound exudate

治癒に数か月以上を要する褥瘡の治癒期間を短縮するために、本研究では創部に貼付した創傷被覆材が創の上で自動的に創部アセスメントを行う『on woundアセスメント』を提唱し、滲出液エクソソームとの融合能を有する人工リポソームを固相化した創傷被覆材を開発する。人工リポソームにはmiRNAを体表温度を利用して特異的に増幅する低温反応性LAMP反応液を充填する。本目的を達成するために、（1）褥瘡滲出液のエクソソームおよびエクソソームmiRNAの分析、(2)人工リポソームを使った滲出液エクソソームmiRNA検出技術の確立、(3)人工リポソームを固相化した創傷被覆材の作製、および(4)滲出液miRNA検出能を備えた創傷被覆材の妥当性および効果検証を、臨床調査、In vitro実験、動物実験を組み合わせて実施する。本年度は、本課題の基盤技術となるリポソーム作製法について研究協力者である竹内昌治先生より技術移転を受け、本学内に新たな設備を準備し、再現性の高いリポソーム作製プロトコルを完成させた。また、検出技術として低温反応性LAMP法の確立のため、従来のLAMP法の実施と、低温反応性プローブの作製を試みた。

治癒に数か月以上を要する褥瘡の治癒期間を短縮するために、本研究では創部に貼付した創傷被覆材が創の上で自動的に創部アセスメントを行う『on woundアセスメント』を提唱し、滲出液エクソソームとの融合能を有する人工リポソームを固相化した創傷被覆材を開発する。人工リポソームにはmiRNAを体表温度を利用して特異的に増幅する低温反応性LAMP反応液を充填する。本目的を達成するために、（1）褥瘡滲出液のエクソソームおよびエクソソームmiRNAの分析、(2)人工リポソームを使った滲出液エクソソームmiRNA検出技術の確立、(3)人工リポソームを固相化した創傷被覆材の作製、および(4)滲出液miRNA検出能を備えた創傷被覆材の妥当性および効果検証を、臨床調査、In vitro実験、動物実験を組み合わせて実施する。本年度は、本課題の基盤技術となるリポソーム作製法について研究協力者である竹内昌治先生より技術移転を受け、本学内に新たな設備を準備し、再現性の高いリポソーム作製プロトコルを完成させた。また、検出技術として低温反応性LAMP法の確立のため、従来のLAMP法の実施と、低温反応性プローブの作製を試みた。