权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

酸化ストレス防御因子・DNA修復タンパク質の同定と作用機序の解明

氧化应激保护因子和DNA修复蛋白的鉴定及其作用机制的阐明

基本信息

批准号：
22K12371
负责人：
秋山秋梅
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

電離放射線や細胞の代謝活動で生成する活性酸素種（ROS）は細胞に強い酸化反応を引き起こす作用がある。本研究では、酸化防御・DNA修復因子の細胞や個体での役割の解明を目指している。本年度は、以下五件の成果を上げた。(1)一昨年度よりミトコンドリアで酸化DNA損傷8-oxoGを修復する酵素OGG1-2aの高発現ヒト培養細胞株を樹立し始めたが、本年度は候補となる複数細胞clone、その細胞内OGG1-2aの発現量の解析、gamma線感受性、細胞増殖への影響、酸素依存性、核DNAへの影響を調べた。(2)酸化DNA修復酵素KsgAのDNA結合domainを解明するため、KsgA抗体の精製を行った。抗体を使用してKsgA全長、KsgAのN末端遺伝子欠損とC末端遺伝子欠損のplasmidをそれぞれ大腸菌mutMmutYksgA欠損株に導入した時の発現量を比較した。得られた結果は論文として国際英文誌で公表した。(3)非分裂期線虫BERなど変異株とatm、 ced-1、daf-16変異株の超高線量放射線への応答解析を行なった。欠損株を用いて3000Gyのgamma線あるいはCarbon-beamで照射を行い、運動への影響や回復有無を観察した。(4)分裂期である線虫（C.elegans）(胚発生時期)塩基除去修復(BER)変異株及び二重変異株においてDNA損傷剤の胚発生へ影響を調べた、BER欠損株孵化時の細胞死を蛍光染色観察で行った。その一部の成果は日本分子生物学会で発表した。(5)ヒト細胞における酸化タンパク質を還元する酵素GLRX1を過剰発現する細胞株の樹立を行ったが、得られた細胞株を用いて、過剰発現細胞の放射線の他、酸素の影響、H2O2などの酸化ストレス感受性、核DNA損傷の有無についての解析を更に確認・解析実験を行った。得られた成果の一部は国際学会（ATW）で発表した。

Ionizing radiation や cell metabolic activity ので generated する active acid element types of cells (ROS) はにい acidification reverse 応を lead き up こす role がある. This study でで, acidification defense · DNA repair factor <s:1> cell や individual で <s:1> corpotomy <e:1> clarifies the を target of をてるるるるる. This year を, the following five items are listed on をげた. (1) last year よりミトコンドリアで acidification DNA damage 8 - oxoG を repair す OGG1 る enzyme - 2 a high の発 now ヒト culture cell lines を set し beginning めたが, this year's は alternate となる plural cell clone, そ OGG1 の cell - 2 a の発 is の parsing, gamma sensitivity, cells raised colonization への The sound, acid-dependent nature, and nuclear DNAへ <s:1> influence を modulation べた. (2) Acidified DNA repair enzyme KsgA, DNA-binding domainを clarification するため, KsgA antibody を refinement った. Antibody を use して KsgA span, KsgA の N terminal heritage 伝 son owe loss と C terminal heritage 伝 son owe loss の plasmid をそれぞれ coliform mutMmutYksgA owe damage strain に import した when の発を now quantity comparing した. The られた results of the られた paper とててて international journal of English で public table たた. (3) Non-mitotic nematodes BERな <s:1> mutant strains とatm, ced-1, DF-16 mutant strains <s:1> ultra-high line radiation へ応 answer explanation を rows なった. Owe loss を strains with いて 3000 gy の gamma line あるいは Carbon - beam line をいで exposure, sports への influence や reply whether を観 examine した. (4) divide である nematodes (c. elegans) (born embryo 発 period) salt to remove repair (BER) - different strains and び double - different strains において DNA damage tonic の embryo 発 raw へ influence を adjustable べた, BER owe damage strain hatch の cell death を蛍 light dyeing line 観 examine でった. Youdaoplaceholder0 そ a そ achievement で The Japanese Society for Molecular Biology で release たた. Cells (5) ヒトにおける acidification タンパク qualitative を also yuan する enzyme GLRX1 を before turning 発 now する cell lines の line set をったが, られた cell lines を with いて, turning 発 cell の radiation の his, acid の influence, H2O2 などの acidification ストレス sensibility, nuclear DNA damage の presence of についての parsing を more に confirm solution Mitsuru is engaged in を and った. The られた result is a で international society (ATW) で issue a report た.