Rapid Analysis of Fatty Acid Profile in trace amounts of whole blood

本年度は、血中に含まれる高度不飽和脂肪酸成分（PUFA）を選択的に検出できる、反応熱脱着システムを構築することを目指した。まずは基礎検討として、最適な反応熱脱着条件を決定することを試みた。そのための計測手法として、ミクロ反応炉と質量分析装置（MS）間を、GCオーブン内に搭載したトランスファーラインを介して直結した発生ガス-MS装置を使用した。具体的な操作手順としては、まず血液を含浸させたろ紙試料（ろ紙血液検体）を反応試薬（トリフルオロメチル基を有する四級アンモニウム塩）と共存させて、一定温度に保持したミクロ反応炉に導入した。次に、そこで生じた反応生成物をオンラインでMS部に導入して、試料成分の反応挙動をモニタリングすることにした。その結果、反応温度および反応時間をそれぞれ300℃および20秒に設定したときに、ろ紙の熱分解生成物の発生量を最小限に抑制しつつ、PUFA類を最も効率よく検出できることが分かった。そこで、これらの反応条件下において、血液検体の反応熱脱着GC測定を実施した。ここではミクロ加熱炉を、高分解能キャピラリー分離カラムを備えた汎用型GC（検出器には水素炎イオン化検出器を使用）に直結した測定システムを用いた。その結果得られたクロマトグラム上にはエイコサペンタエン酸（EPA）やドコサヘキサエン酸（DHA）などのPUFA類を含む、一連の脂肪酸成分がマトリックス成分による妨害を受けることなく、選択的かつ高感度に観測された。さらに、それらのピーク面積を感度補正することにより、脂肪酸成分の化学組成（脂肪酸プロファイル）、ひいてはPUFA類のn-6/n-3比を迅速かつ簡便に解析することが可能になった。

本年度は、血中に含まれる高度不飽和脂肪酸成分（PUFA）を選択的に検出できる、反応熱脱着システムを構築することを目指した。まずは基礎検討として、最適な反応熱脱着条件を決定することを試みた。そのための計測手法として、ミクロ反応炉と質量分析装置（MS）間を、GCオーブン内に搭載したトランスファーラインを介して直結した発生ガス-MS装置を使用した。具体的な操作手順としては、まず血液を含浸させたろ紙試料（ろ紙血液検体）を反応試薬（トリフルオロメチル基を有する四級アンモニウム塩）と共存させて、一定温度に保持したミクロ反応炉に導入した。次に、そこで生じた反応生成物をオンラインでMS部に導入して、試料成分の反応挙動をモニタリングすることにした。その結果、反応温度および反応時間をそれぞれ300℃および20秒に設定したときに、ろ紙の熱分解生成物の発生量を最小限に抑制しつつ、PUFA類を最も効率よく検出できることが分かった。そこで、これらの反応条件下において、血液検体の反応熱脱着GC測定を実施した。ここではミクロ加熱炉を、高分解能キャピラリー分離カラムを備えた汎用型GC（検出器には水素炎イオン化検出器を使用）に直結した測定システムを用いた。その結果得られたクロマトグラム上にはエイコサペンタエン酸（EPA）やドコサヘキサエン酸（DHA）などのPUFA類を含む、一連の脂肪酸成分がマトリックス成分による妨害を受けることなく、選択的かつ高感度に観測された。さらに、それらのピーク面積を感度補正することにより、脂肪酸成分の化学組成（脂肪酸プロファイル）、ひいてはPUFA類のn-6/n-3比を迅速かつ簡便に解析することが可能になった。