Functional analysis of macrophages in obesity focusing on nitration-modified proteins

肥胖中巨噬细胞的功能分析，重点关注硝化修饰蛋白

• 批准号: 22K11836
• 负责人: 志村 絵理
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K11836/
• 关键词: ニトロ化; マクロファージ; 炎症; 脂肪組織

M1マクロファージ(M1Mφ)は脂肪組織での炎症誘導における主要な細胞として議論されていることから、その分化・機能制御を可能とすることで、肥満を基盤とする疾患の抑制につながることが期待される。そこで本研究では、M1Mφを介した脂肪組織における新たな炎症誘導メカニズムの発見を目指している。これまでの予備実験からM1Mφにおいてタンパク質のニトロ化修飾の制御がなされている可能性を見出している。タンパク質のニトロ化修飾は酸化ストレスにより生体内で生じたペルオキシナイトライトにより誘導されることが知られている。既報においてニトロ化修飾によりタンパク質へ機能変化がもたらされる可能性が示唆されてきているが、詳細なメカニズムは不明であり、タンパク質の機能にニトロ化修飾が影響することを実証した報告は殆どない。そこで本研究ではM1Mφにおける脱ニトロ化タンパク質の機能の解明に着目し、その知見を脂肪組織での新たな炎症メカニズムの理解に繋げるため研究を進めている。今年度はM1Mφ誘導条件(LPS及びIFN-γ存在下)で培養したRaw264.7細胞について脱ニトロ化もしくはニトロ化が誘導されるタンパク質の同定を進めた。LC-MS/MSを用いて、ニトロ化されるタンパク質は3種類、脱ニトロ化されるタンパク質は1種類同定し、各タンパク質におけるニトロ化部位(もしくは脱ニトロ化)部位も調べており、現在、再現性の確認を進めている。

M1Mφ is the main cell for inflammation induction in subcutaneous fat. It is expected that the main cell for inflammation induction, differentiation and functional control may be inhibited. In this study, M1Mφ was introduced into subcutaneous fat, and new inflammation-inducing mechanisms were identified. The possibility of controlling the quality of the prepared material from M1Mφ to M2 M φ is shown. In vivo, the protein is produced by the reaction of a protein with a protein. Report on the possibility of changing the quality of the product and the effect of changing the quality of the product. This study is aimed at understanding the function of subcutaneous fat and its inflammation. This year, Raw264.7 cells were cultured under M1Mφ induction conditions (LPS and IFN-γ). LC-MS/MS is used in the middle, middle,

项目成果

Mass spectrometric identification of tryptophan nitration sites on proteins in M1-polarized macrophages

M1 极化巨噬细胞中蛋白质色氨酸硝化位点的质谱鉴定

• 发表时间: 2022
• 作者: Eri Shimura;Ayako Shigenaga;Aiki Murayama;Tomoya Nakagawa;Ryo Ishihara;Takeshi Baba;Fumiyuki Yamakura
• 通讯作者: Fumiyuki Yamakura