Elucidation of pathophysiology of pseudoallergy and inflammation induced by molecules absorbed through the skin and form gastrointestinal tract

本研究の目的は、新たに作製したMRGPRX2ノックインマウスを利用してMRGPRX2リガンドの生体内スクリーニング系を確立し、皮膚・粘膜から吸収される分子が引き起こす偽アレルギーや炎症の病態を解明することである。野生型マウス、Mrgprb2-KOマウス、MRGPRX2-KIマウスから骨髄由来マスト細胞（BMMC)と腹腔マスト細胞を誘導した。Mrgprb2/MRGPRX2リガンドであるコンパウンド48/80を添加すると、いずれのBMMCも脱顆粒しなかった。一方、野生型とMRGPRX2-KI腹腔マスト細胞はコンパウンド48/80に反応して脱顆粒したが、Mrgprb2-KO腹腔マスト細胞は脱顆粒しなかった。また、MRGPRX2-KI腹腔マスト細胞は野生型腹腔マスト細胞より強く脱顆粒した。次に、これらのマウスの耳介にコンパウンド48/80を皮下注射してから色素を静脈注射したところ、野生型とMRGPRX2-KIマウスの耳介には色素漏出が認められた。一方、Mrgprb2-KOマウスの耳介には色素漏出が認められなかった。また、in vitro実験の結果と一致して、野生型マウスよりMRGPRX2-KIマウスの耳介における色素漏出量は多かった。これらの結果は、MRGPRX2に対して示すEC50がMrgprb2の場合と比べて低い事実と一致する。このように、MRGPRX2/Mrgprb2リガンドの生体内スクリーニング系が確立したので、種々の分子のスクリーニングを開始している。

本研究の目的は、新たに作製したMRGPRX2ノックインマウスを利用してMRGPRX2リガンドの生体内スクリーニング系を確立し、皮膚・粘膜から吸収される分子が引き起こす偽アレルギーや炎症の病態を解明することである。野生型マウス、Mrgprb2-KOマウス、MRGPRX2-KIマウスから骨髄由来マスト細胞（BMMC)と腹腔マスト細胞を誘導した。Mrgprb2/MRGPRX2リガンドであるコンパウンド48/80を添加すると、いずれのBMMCも脱顆粒しなかった。一方、野生型とMRGPRX2-KI腹腔マスト細胞はコンパウンド48/80に反応して脱顆粒したが、Mrgprb2-KO腹腔マスト細胞は脱顆粒しなかった。また、MRGPRX2-KI腹腔マスト細胞は野生型腹腔マスト細胞より強く脱顆粒した。次に、これらのマウスの耳介にコンパウンド48/80を皮下注射してから色素を静脈注射したところ、野生型とMRGPRX2-KIマウスの耳介には色素漏出が認められた。一方、Mrgprb2-KOマウスの耳介には色素漏出が認められなかった。また、in vitro実験の結果と一致して、野生型マウスよりMRGPRX2-KIマウスの耳介における色素漏出量は多かった。これらの結果は、MRGPRX2に対して示すEC50がMrgprb2の場合と比べて低い事実と一致する。このように、MRGPRX2/Mrgprb2リガンドの生体内スクリーニング系が確立したので、種々の分子のスクリーニングを開始している。