The mechanism of neurogenesis in the rat dorsal root ganglion

[本研究の目的]　後根神経節(DRG)において成体神経新生が起こるかどうかについては賛否両論が存在し、未だに不明な点が多い。DRGにおいて神経新生が起こるとすれば、そのメカニズム解明はDRG神経脱落に由来する後根神経節炎といった難治性疾病の治療に道を拓く。本研究では、DRGにおける神経新生が本当に起こるのかどうかを明らかにし、これが起こる場合その神経新生の神経科学的・生物学的基盤を明らかにすることを目的とする。[研究成果の具体的内容]　メチル水銀を投与した水俣病モデルラットを作製した。また分裂細胞のラベルを目的としてBrdUを複数回腹腔内投与した。投与開始後1週間毎にDRG凍結切片標本を作成した。凍結標本をBrdU特異的抗体および神経細胞マーカーで染色したが、これまでのところBrdU陽性の神経細胞は確認できていない。また、DRG内GFAP陽性細胞（アストロサイトおよびSGC）が神経幹細胞であるという仮説を立て、AAV6-mGFAP-CreおよびAAV6-CBh-FLEX-EGFPの2種のアデノ随伴ウイルスを作製し、これをDRGに直接投与することでGFAP陽性細胞特異的にEGFPを発現させ、これが神経細胞に分化するかどうかについて現在検討を行っている。[研究成果の意義および重要性]　DRGにおいて傷害依存的神経新生が本当に起こっているかどうかについてはまだ明確な証拠を得ていない。しかしながら単位面積あたりの神経細胞数はメチル水銀投与終了後掲示的に増加するという結果は以前の研究より複数回確かめられており、神経細胞が増殖している可能性が強く示唆されている。今回のBrdU投与条件においては神経新生が観察されなかったものの、今回の投与スケジュールとは異なる期間に細胞分裂・神経細胞への分化が起こる可能性が示された点において重要な知見が得られたと考える。

[本研究の目的]　後根神経節(DRG)において成体神経新生が起こるかどうかについては賛否両論が存在し、未だに不明な点が多い。DRGにおいて神経新生が起こるとすれば、そのメカニズム解明はDRG神経脱落に由来する後根神経節炎といった難治性疾病の治療に道を拓く。本研究では、DRGにおける神経新生が本当に起こるのかどうかを明らかにし、これが起こる場合その神経新生の神経科学的・生物学的基盤を明らかにすることを目的とする。[研究成果の具体的内容]　メチル水銀を投与した水俣病モデルラットを作製した。また分裂細胞のラベルを目的としてBrdUを複数回腹腔内投与した。投与開始後1週間毎にDRG凍結切片標本を作成した。凍結標本をBrdU特異的抗体および神経細胞マーカーで染色したが、これまでのところBrdU陽性の神経細胞は確認できていない。また、DRG内GFAP陽性細胞（アストロサイトおよびSGC）が神経幹細胞であるという仮説を立て、AAV6-mGFAP-CreおよびAAV6-CBh-FLEX-EGFPの2種のアデノ随伴ウイルスを作製し、これをDRGに直接投与することでGFAP陽性細胞特異的にEGFPを発現させ、これが神経細胞に分化するかどうかについて現在検討を行っている。[研究成果の意義および重要性]　DRGにおいて傷害依存的神経新生が本当に起こっているかどうかについてはまだ明確な証拠を得ていない。しかしながら単位面積あたりの神経細胞数はメチル水銀投与終了後掲示的に増加するという結果は以前の研究より複数回確かめられており、神経細胞が増殖している可能性が強く示唆されている。今回のBrdU投与条件においては神経新生が観察されなかったものの、今回の投与スケジュールとは異なる期間に細胞分裂・神経細胞への分化が起こる可能性が示された点において重要な知見が得られたと考える。