炎症・免疫応答を司る骨格筋特異的メカニカルストレス受容体の新規同定と機能解析

控制炎症和免疫反应的骨骼肌特异性机械应力受体的新鉴定和功能分析

• 批准号: 22K11505
• 负责人: 佐々木 文之
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2027-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K11505/
• 关键词: メカノバイオロジー; 骨格筋; 炎症; 免疫応答; IL-6

我々は、適度な運動が様々な臓器・組織の炎症を抑制し、免疫機能を向上させる効果を有すること、一方で、過度な筋力トレーニングなど激しい運動は過剰な炎症及び免疫機能の低下を引き起こすことを経験的に理解している．しかし、未だにその分子機序の全容解明には至っていない。本計画では、メカニカルストレス刺激により骨格筋から分泌されるタンパク質、IL-6を指標とした高感度スクリーニング法を独自に構築し、これを用いて骨格筋特異的に発現している新規メカニカルストレス受容体の同定とその機能解析を試みる。令和４年度は、CRISPR/Cas9法を用いた内因性IL-6を検出するレポーター細胞の樹立およびスクリーニングの着手を計画した。これまでの成果として、伸展圧縮装置を用いた培養系の立ち上げとして、専用チャンバー上での骨格筋由来筋芽細胞株C2C12の骨格筋細胞への分化および培養上清中のIL-6の測定に成功している。一方で、CRISPR/Cas9法によるC2C12のIL-6遺伝子座へのレポーター遺伝子導入（HiBiTまたはEGFP）にやや時間を要している。また、スクリーニングで使用する材料のツールの準備は予定通り進んでいる。

We have to exercise moderately to suppress inflammation in tissues and improve immune function. We have to exercise moderately to suppress inflammation and improve immune function. A complete understanding of the molecular mechanisms involved in the development of the disease. In this project, we constructed an independent method for the identification and function analysis of bone muscle-specific receptors by using the new method for the identification and function analysis of bone muscle-specific receptors. In 2004, CRISPR/Cas9 method was used to detect IL-6 gene expression and to establish the gene expression system. The results showed that the differentiation and IL-6 assay of osteoblast cells derived from osteoblast cell line C2C12 were successful in culture system and culture supernatant. The CRISPR/Cas9 method is used to introduce C2C12 gene into the gene vector (HiBiT EGFP). The preparation of the materials used in the preparation process is determined by the user.