革新的メチルグリオキサール定量法による糖尿病性骨粗鬆症の病態解明と新規治療の探索

マウス頭蓋冠由来骨芽細胞およびマウス骨髄血由来破骨細胞に対して、メチルグリオキサール（MG）反応性蛍光センサープローブを用いて細胞内MG産生の評価をおこなった。siRNAを用いてMGを消去する酵素であるGlyoxakase1をノックダウンすることでMGが細胞内で増加することを時間依存的シグナルを評価することで確認することに成功した。また解糖系代謝酵素であるGAPDHをsiRNAで阻害することでGlyoxalase1をコードする遺伝子であるGlo1の発現が増加する可能性がRT-PCR で明らかとなった。これは高血糖によるGAPDHの不活化によるMGの著増に反応してGlo1の発現が増加するというフィードバック機構を表現するものである可能性がある。さらに代謝を抑制することにより検討を行っている。マウスにおいてストレプトゾトシンを投与することで1型糖尿病性骨粗鬆症マウスを作成し、その骨パラメーターと遺伝子発現を評価した。BMDは有意に減少していたが、Glo1の発現には有意な差は認めなかった。これはGAPDHの不活化によりGlo1遺伝子が誘導される機構が残存しているために生細胞内でのGlo1の発現は著明には減少せず、またGlo1遺伝子の発現にも細胞内でのばらつきがあることからコントロールマウスとは有意な差がない可能性を考えている。マウスをまた骨芽細胞と破骨細胞の共培養や、ストレプトゾトシンでの糖尿病マウスを作成を進行し始めている。

マウス頭蓋冠由来骨芽細胞およびマウス骨髄血由来破骨細胞に対して、メチルグリオキサール（MG）反応性蛍光センサープローブを用いて細胞内MG産生の評価をおこなった。siRNAを用いてMGを消去する酵素であるGlyoxakase1をノックダウンすることでMGが細胞内で増加することを時間依存的シグナルを評価することで確認することに成功した。また解糖系代謝酵素であるGAPDHをsiRNAで阻害することでGlyoxalase1をコードする遺伝子であるGlo1の発現が増加する可能性がRT-PCR で明らかとなった。これは高血糖によるGAPDHの不活化によるMGの著増に反応してGlo1の発現が増加するというフィードバック機構を表現するものである可能性がある。さらに代謝を抑制することにより検討を行っている。マウスにおいてストレプトゾトシンを投与することで1型糖尿病性骨粗鬆症マウスを作成し、その骨パラメーターと遺伝子発現を評価した。BMDは有意に減少していたが、Glo1の発現には有意な差は認めなかった。これはGAPDHの不活化によりGlo1遺伝子が誘導される機構が残存しているために生細胞内でのGlo1の発現は著明には減少せず、またGlo1遺伝子の発現にも細胞内でのばらつきがあることからコントロールマウスとは有意な差がない可能性を考えている。マウスをまた骨芽細胞と破骨細胞の共培養や、ストレプトゾトシンでの糖尿病マウスを作成を進行し始めている。