ダブルドメインセルラーゼの吸着バランス制御による結晶性多糖構造分解反応の促進

通过控制双域纤维素酶的吸附平衡促进结晶多糖结构分解反应

• 批准号: 13J07574
• 负责人: 中村 彰彦
• 金额: $ 1.62万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J07574/
• 关键词: セルラーゼ; セルロース; プロセッシビティ; 結晶性セルロース; セロビオヒドロラーゼ

セルロース分解性のカビTrichoderma reesei由来のセロビオヒドロラーゼ型Cel7 (TrCel7A)は結晶性セルロースを分解する活性が高い事が知られている。TrCel7Aは吸着ドメインと触媒ドメインがリンカー領域で繋がった構造をしている。特に触媒ドメインはトンネル状の構造をしており、セルロース鎖を連続的に分解する事が知られている。本研究ではTrCel7Aのどのような構造的特徴が結晶性セルロース分解に寄与しているのか明らかにする事を目的としている。TrCel7Aの触媒ドメインの基質結合サイト-4に存在するトリプトファン残基(Trp38)は、トンネル型構造の入り口に存在しており、全てのセロビオヒドロラーゼ型Cel7に保存されている残基である。しかしその機能については分かっていない。そこでTrCel7AのTrp38をアラニンに変化させた変異体(W38A)の結晶性セルロースの分解活性を調べた所、天然型酵素と比較して著しく低下する事が分かった。その原因を調べるため可溶性セロオリゴ糖の分解パターンを詳細に検討した結果、W38Aでは基質の取り込み速度が低下している事が判明した。また理論計算によって基質結合サイトの結合エネルギーを確認すると、W38Aでは活性中心へ向かう結合エネルギーのグラジエントが崩れていることが分かった。即ちTrp38残基はセルロース分子鎖を活性中心に送り込む為に存在している事が明らかとなった。

里氏木霉（Trichoderma reesei）是里氏木霉（Trichoderma reesei）的一种因其具有较高的抗真菌活性而被广泛应用的真菌。TrCel7A具有高灵敏度的触摸屏，可用于检测人体内的各种器官。特に触媒ドメインはトンネル状の構造をしており、セルロース鎖を連続的に分解する事が知られている。本研究采用纳米TrCel7A纳米晶微球制造的特发晶性纳米晶微球分离纯化与纳米晶纳米晶微球分离纯化的目的微球微球。TrCel7A触摸屏触摸式护理基复合触摸屏-4除现有触摸屏触摸式护理基（Trp38）外，还包括触摸式护理基（Trp38）、触摸式护理型制造输入请求口和现有触摸式护理请求口、全触摸式护理基（全触摸式护理基）和触摸式护理基复合触摸屏-4除现有触摸式护理基（Trp 38）外。しかしその機能については分かっていない。氢化物TrCel7A和Trp38低取代度氢化物还原酶体（W38A）结晶性氢化物还原酶分解活性染料所，天然型氢化物比蒽甲醛显著降低了底物的浓度。因过敏原因导致的过敏性低血糖患者糖份分解加快，导致血糖水平下降，W38A型糖尿病基础诊断试剂盒（酶法）要求在一定程度上降低血糖水平。W38A型活动中心向北延伸，形成了一个圆形的圆形的椭圆形的椭圆形结构，形成了一个圆形的椭圆形结构。即为Trp38基氢氧化钠分子筛活性中心发送申请并将存在的氢氧化钠事件明确告知申请人。

项目成果

Trade-off between Processivity and Hydrolytic Velocity of Cellobiohydrolases at the Surface of Crystalline Cellulose

• DOI: 10.1021/ja4119994
• 发表时间: 2014-03-26
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
• 影响因子: 15
• 作者: Nakamura, Akihiko;Watanabe, Hiroki;Samejima, Masahiro
• 通讯作者: Samejima, Masahiro

可溶性オリゴ糖を用いたTrCel7Aのプロセッシブ反応の解析

使用可溶性寡糖分析 TrCel7A 的持续反应

• 发表时间: 2014
• 作者: 中村彰彦;塚田 剛士,Sanna Auer;Anu Koivula;五十嵐 圭日子;鮫島 正浩
• 通讯作者: 鮫島 正浩

Molecular and functional analysis of glycoside hydrolase family 7 cellobiohydrolases from filamentous fungi

丝状真菌糖苷水解酶家族 7 纤维二糖水解酶的分子和功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 中村彰彦;渡辺大輝;古田忠臣;塚田 剛士;Sanna Auer;Anu Koivula,内橋貴之;安藤敏夫;五十嵐 圭日子;鮫島 正浩
• 通讯作者: 鮫島 正浩

Molecular mechanisms for cellulose hydrolysis of glycoside hydrolase family 7 cellobiohydrolases from fungi.

来自真菌的糖苷水解酶家族 7 纤维二糖水解酶水解纤维素的分子机制。

• 发表时间: 2013
• 作者: Akihiko Nakamura;Ishida;T.;Fushinobu;S.;Kusaka K.;Tanaka I.;Inaka;K.;Masaki;M.;Ohta;K.;Kaneko S.;Niimura;N.;Samajima M. and Igarashi K.
• 通讯作者: Samajima M. and Igarashi K.

糸状菌由来糖質加水分解酵素ファミリー7セロビオヒドロラーゼの機能解析

丝状真菌碳水化合物水解酶家族 7 纤维二糖水解酶的功能分析

• 发表时间: 2013
• 作者: 中村 彰彦;塚田 剛士;古田 忠臣;Sanna Auer;Anu Koivula;石田 卓也;五十嵐 圭日子;鮫島 正浩
• 通讯作者: 鮫島 正浩