生体外培養を用いた魚類卵濾胞の最終成熟分子機構の解明

利用体外培养阐明鱼卵卵泡最终成熟的分子机制

• 批准号: 13J02197
• 负责人: 石原 学
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J02197/
• 关键词: 排卵能; 卵成熟能; 卵成熟・排卵; LH; 次世代シーケンサー; 生体外配偶子生産; 卵濾胞培養; 精子培養; 採卵適期推定; LH感受性; 試験管ベビー

これまでに、魚類の卵濾胞は、黄体形成ホルモン（LH）により卵成熟能を獲得後、さらにLHが作用することで排卵能を獲得する事が示唆されているが、その詳細については明らかとされていない。本研究では、卵濾胞の成熟進行度の経時的変化と、特に排卵能に関してその分子機構に関する知見の集積を目的とした。まず、チョウザメ類を対象とし、卵濾胞培養系を用いて卵濾胞の成熟進行度の変化および獲得時期を調べた。その結果、卵成熟能を有する卵母細胞、および排卵能を獲得できる能力を有する卵濾胞は7月から8月に出現し始めた。組織学的観察の結果、これらの月の卵母細胞のステージは卵黄形成完了前であることが示唆されたが、これは他魚種では全く報告の無い新知見である。また、排卵能の獲得傾向は個体ごとに異なるものの大きく4種類に分類することが可能であり、増加傾向にある個体からは良質卵が得られたことから、個体ごとの排卵誘導適期の見極めに応用できる。次世代シーケンサーを用いて排卵能に関わる遺伝子群を探索したところ、ニホンウナギからは7個、コチョウザメからは15個の排卵能獲得関連遺伝子が選抜された。また、他魚種で既知の排卵関連遺伝子としてそれぞれ7個および5個が選抜された。これらの遺伝子のうち、特に、mmp9およびptgs2は排卵能獲得に関与する遺伝子として何らかの役割を有すると推測された。今後は発現量を指標として簡便な卵濾胞の成熟進行度の判別および排卵誘導適期の推定が可能になると考えられる。また、チョウザメ類において精子培養による未熟な精巣内精子の運動能獲得誘導に成功した。さらに、卵濾胞培養後に排卵された生体外由来の卵、および培養精子を用いた試験管ベビーの作出にも成功している。孵化率は高い個体において90%に達し、同一個体から複数回にわたる作出が可能であることから、今後種苗生産方法の一つとしても有効である。

の こ れ ま で に, fish eggs follicular は, corpus luteum formation ホ ル モ ン (LH) に よ り eggs mature can get after を, さ ら に LH が role す る こ と で ovulation can get す を が る things in business さ れ て い る が, そ の detailed に つ い て は Ming ら か と さ れ て い な い. This study で は, eggs follicular の mature for degrees の 経 - と, に of ovulation can に masato し て そ の molecular institutions に masato す る knowledge の set product を purpose と し た. ま ず, チ ョ ウ ザ メ class を like と seaborne し, eggs follicular development department を with い て eggs follicular の の mature for degrees - the お よ び を adjustable gain period べ た. そ の results, mature eggs can を す る oocytes, お よ び ovulation can get で を き る を power す る eggs follicular は July か ら beginning August に appear し め た. Histological 観 の results, こ れ ら の month の oocytes の ス テ ー ジ は vitellogenesis finished before で あ る こ と が in stopping さ れ た が, こ れ は he species で は く report no い の knowledge see all で あ る. ま た, ovulation can get tendency は の individual ご と に different な る も の の big き く 4 kinds に classification す る こ と が may で あ り, rights and tendency に あ る individual か ら は が have good quality eggs ら れ た こ と か ら, individual ご と の ovulation induction in suitable の see very め に 応 with で き る. Nextgen シ ー ケ ン サ ー を with い て ovulation can に masato わ る heritage 伝 subgroup を explore し た と こ ろ, ニ ホ ン ウ ナ ギ か ら は 7, コ チ ョ ウ ザ メ か ら は 15 の ovulation can obtain masato even heritage 伝 が son choose sorting さ れ た. Youdaoplaceholder0, for other fish species で, it is known that there are 伝 offspring related to ovulation と てそれぞれ7 および5 が selected された された. こ れ ら の posthumous son 伝 の う ち, に, mmp9 お よ び ptgs2 は ovulation can obtain に masato and す る posthumous son 伝 と し て what ら か の "を have cut す る と speculation さ れ た. Future は を 発 now quantity index と し て simple な eggs follicular の mature for degrees の discriminant お よ び ovulation induction presumption in suitable の が may に な る と exam え ら れ る. Youdaoplaceholder0 and チョウザメ types of にお て て sperm culture による immature な sperm <s:1> motility can be induced に successful た た. さ ら に, eggs follicular development に after ovulation さ れ た origin の eggs in vitro, お よ び improve sperm を い た test tube ベ ビ ー の make に も successful し て い る. High hatchability は い individual に お い て 90% に し, the same individual か ら plural back に わ た る may make が で あ る こ と か ら, future seedlings production methods の つ と し て も have sharper で あ る.

项目成果

Indicators for artificial induction of ovulation in bester sturgeon (Huso huso × Acipenser ruthenus)

最佳鲟鱼（Huso huso × Acipenser ruthenus）人工诱导排卵指标

• 发表时间: 2014
• 作者: ○Ishihara M;Tokui B;Abe T;Ijiri S and Adachi S
• 通讯作者: Ijiri S and Adachi S

Seasonal changes in oocyte maturational competence and ovulatory competence in bester sturgeon (Huso huso × Acipenser ruthenus)

最佳鲟鱼（Huso huso × Acipenser ruthenus）卵母细胞成熟能力和排卵能力的季节变化

• 发表时间: 2013
• 作者: Chiaki I. Yasuda;Satoshi Wada;Manabu Ishihara
• 通讯作者: Manabu Ishihara