ヘテロクロマチンにおけるＤＮＡ修復メカニズムの解明

阐明异染色质中的 DNA 修复机制

• 批准号: 13J02547
• 负责人: 磯部 真也
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J02547/
• 关键词: DSB修復; Homologous recombination; 53BP1; Rif1; ヘテロクロマチン; DNA修復; HP1

新規DNA損傷応答タンパク質SCAI/HPB66が53BP1のCDKによるリン酸化 (リン酸化S/T-P site) を認識して結合し、DNA損傷部位集積していることを示した。また、SCAI/HPB66ノックダウンによる影響を調べたところ、Homologous recombination (HR) に関わる重要なタンパク質郡のDNA損傷への集積が顕著に減退することが分かった。HRの効率をレポーターアッセイ系で評価したところ、SCAI/HPB66ノックダウンによりHRが抑制されていることが明らかとなった。2013年、53BP1のATMによるリン酸化 (リン酸化S/T-Q site) に結合するタンパク質としてRif1が同定され、HRに抑制的に働いていることが報告された。SCAIとRif1の関係を調べてみると、認識する53BP1のリン酸化サイト、制御しているリン酸化酵素が異なること、SCAIとRif1の53BP1の結合領域が同じであること、Rif1ノックダウン細胞ではSCAIと53BP1の結合が強くなることが分かった。これらの結果から、SCAIとRif1は排他的に53BP1と結合し、SCAIはRif1のHR抑制機能を更に阻害することでHRを促進していることが考えられた。実際、HR進行に重要なタンパク質の集積の減退は、SCAI, Rif1ダブルノックダウンの細胞では見られなくHR進行が回復した。また、Rif1に結合するタンパク質として脱リン酸化酵素PP1が知られており、我々のRif1のプロテオミクスの解析からもRif1結合タンパク質としてPP1が同定された。PP1はRif1依存的にDNA損傷部位に集積すること、PP1阻害剤を添加すると、BRCA1の集積が増加することから、PP1とDNA損傷に関しても新たな展望が得られそうである。以上の研究結果を論文にし、現在投稿中である。

The new DNA system responds to the combination of SCAI/HPB66, 53BP1, CDK, acidification, S/T-P site, and DNA location sets. In the first place, SCAI/HPB66

项目成果

HPB66 facilitates homologues recombination by counteracting with Rif1

HPB66 通过对抗 Rif1 促进同源物重组

• 发表时间: 2014
• 作者: S.-Y. Isobe;K. Nagao;Y. -N. Ohkubo;H. Kimura;C. Obuse;小布施 力史;磯部真也;小布施力史;大久保 義真;長尾 恒治;石本 祥平;磯部 真也;小布施 力史;小布施力史;磯部真也
• 通讯作者: 磯部真也

Elucidation of structure and function of heterochromatin through human HP1 binding proteins

通过人 HP1 结合蛋白阐明异染色质的结构和功能

• 发表时间: 2014
• 作者: S.-Y. Isobe;K. Nagao;Y. -N. Ohkubo;H. Kimura;C. Obuse;小布施 力史;磯部真也;小布施力史;大久保 義真;長尾 恒治;石本 祥平;磯部 真也;小布施 力史;小布施力史
• 通讯作者: 小布施力史

DSB repair pathway choice in controlled by differential phosphorylation of 53BP1.

DSB 修复途径的选择由 53BP1 的差异磷酸化控制。

• 发表时间: 2015
• 作者: Toru Kondo;Daisuke Ishihara;Hidehiro Kaneda;Keichiro Nakamichi;Sachi Takaba;Hiroshi Kobayashi;Takafumi Ootsubo;Jeonghyun Pyo;Takashi Onaka;Isobe Shin-Ya
• 通讯作者: Isobe Shin-Ya

新規HP1結合タンパク質は、53BP1のDNA損傷部位への集積を促進する

一种新型 HP1 结合蛋白促进 53BP1 在 DNA 损伤位点的积累

• 发表时间: 2013
• 作者: 嶋岡毅紘; 金子純一; 渡邊幸志;坪田雅功;新名宏章;茶谷原昭義;鹿田真一;H. Kaneda;磯部 真也
• 通讯作者: 磯部 真也