中心子前駆体の分子基盤の解明：　普遍的な中心子形成機構の理解に向けて

阐明中心粒前体的分子基础：了解普遍的中心粒形成机制

• 批准号: 13J03304
• 负责人: 白土 玄
• 金额: $ 2.53万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J03304/
• 关键词: 中心体; 細胞分裂; 染色体分配; 細胞生物学; 細胞骨格

本研究課題において、私は紡錘体形成やゲノム安定性に重要な中心体（Centrosome）の中核となる中心子(Centriole) 複製機構の解明を目的としている。3ヵ年の実験計画として、研究実施計画に挙げた「RBM14による中心子異所的形成の抑制機構の解析」、さらにこのRBM14がRNA結合タンパク質として知られていることから「中心子形成に関与するRNAの探索」を手掛け、昨年度はRBM14の研究成果をThe EMBO Journalに掲載することができた。今回はそれに続く採用三年目の研究実施状況について報告する。初年度に行ったRIP-seq 実験によって特定の中心体タンパク質と相互作用する長鎖non-coding RNA(lncRNA)の候補群を同定、これらをCENNA（Centrosomal non-coding RNA）と命名した。これら一群のRNAに対して発現抑制による表現型スクリーニングを行ったところ、際立って強い異常が観察されたのが、CENNA1と命名した機能未知のlncRNAである。培養細胞でその発現を抑制したところ、分裂時の紡錘体の形状が著しく変形し、中心体を含む紡錘体極が完全に脱落する様子が観察された。加えて染色体の整列にも異常をきたしていた。CENNA1は中心体タンパク質SAS-6の近傍に存在するlncRNAとして同定したものであった。しかし、免疫蛍光抗体染色法と蛍光in situ hybridization法（FISH法）を組み合わせた観察の結果は当初の予想とは異なり、中心体よりもむしろ分裂期微小管のプラス端付近に強く局在するというものであった。さらに超解像イメージング法を用いた詳細な表現型観察によって、このlncRNAの発現抑制が動原体と紡錘体微小管との結合を弱めることも判明した。当初注目した中心体タンパク質との相互作用や微小管重合を介した中心子形成へ影響の検討は依然残された課題である。しかしこのようなlncRNAは極めて新奇なものであり、紡錘体形成の制御機構の解明においても極めて重要な発見であると考える。

The subject of this research is the spindle formation, the stability of the spindle, the centrosome, the central core, the centriole, and the purpose of explaining the replication mechanism. 3-year-old の実験计划として、Research Implementation Plan に挙げた「RBM14によるAnalysis of the inhibitory mechanism for the formation of the central substation」、さらにこのRBM14がRN A Combined with the research results of the research results of RBM14 of the previous year and the research results of "centron formation and RNA exploration" of the same company EMBO Journalに掲 containすることができた. This time, we will use the three-year plan to study the implementation status and report on it. RIP-seq of the first year, specific centrosomal non-coding RNA (lncRNA) candidate group, CENNA (Centrosomal non-coding) RNA) and naming. A group of のRNA に対して発 now suppresses the による phenotype スクリーニングを行ったところ, Jili It is a lncRNA with unknown function and named CENNA1. In cultured cells, the appearance of the spindle is inhibited, the shape of the spindle is maintained during division, and the spindle pole is completely removed when the centrosome is contained. The whole sequence of chromosomes added is abnormal. CENNA1 is a centrosome that exists in close proximity to SAS-6 and is identical to lncRNA.しかし, immune 荍光 antibody staining method and 荨光 in situ The hybridization method (FISH method) is based on the results of the combination and the original thinking.なり, centrosome よりもむしろMicrotubule cleavage stage のプラスEnd pay close にstrong bureau in するというものであった.さらにSuper resolution イメージング法を Use いたDetailed なphenotype observation によって、このlnc It is now clear that the binding of RNA to kinetoplasma and spindle microtubules is weak and weak. At first, we focused on the impact of the central body's mass and the interaction of microtubules on the central body's formation, and this is still an ongoing issue. Novel lncRNA, spindle The explanation of the formation of the control mechanism is extremely important and the control mechanism is extremely important.

项目成果

中心体生物学研究室ホームページ

中心体生物学实验室主页

RBM14 prevents assembly of centriolar protein complexes and maintains mitotic spindle integrity.

• DOI: 10.15252/embj.201488979
• 发表时间: 2015-01-02
• 期刊: The EMBO journal
• 作者: Shiratsuchi G;Takaoka K;Ashikawa T;Hamada H;Kitagawa D
• 通讯作者: Kitagawa D

RBM14 prevents de novo assembly of centriolar proteins and maintains genome integrity.

RBM14 可防止中心粒蛋白从头组装并维持基因组完整性。

• 发表时间: 2013
• 作者: Hirose;A. ; Yamawaki;M. ; Kanno;S. ; Igarashi;S. ; Sugita;R. ; Ohmae;Y. ; Tanoi;K. and Nakanishi;T.;白土 玄
• 通讯作者: 白土 玄

RBM14 prevents de novo assembly of centriolar proteins and ma intains genome integrity.

RBM14 可防止中心粒蛋白从头组装并保持基因组完整性。

• 发表时间: 2013
• 作者: Ayumi S. Okamoto;Toru Takeshita;Hideki Iwano;Tohru Danhara;Hirotsugu Nishido; Keewook Yi;Takafumi Hirata and Shuhei Sakata;中空 萌;黒田剛士;白土 玄
• 通讯作者: 白土 玄

中心体生物学研究部門・北川研究室ホームページ

中心体生物学研究部/北川实验室主页