牛プロトテカ性乳房炎に対する防除法の確立

・プロトテカ性乳房炎の分子疫学調査プロトテカ感染牛乳汁160、バルク乳285、腸管内糞便821、飲料水478、他動物糞便4、体液（ルーメン、全血、尿）12、環境（ミルカー、牛床、飼料）89の計1849検体から分離および遺伝子解析を完了した。結果、乳汁サンプルのほとんどが病原遺伝子型とされるgenotype 2（gt2）と同定された。一方、環境サンプルは非病原遺伝子型とされるgenotype 1（gt1）が約70%、gt2が約30%と同定された。また、子牛糞便中からもgt2が検出された。以上から、感染源は腸管内糞便および乳汁であることが示唆され、それらからの汚染により拡大すること可能性が考えられた。また、子牛糞便から検出されたことから、殺藻処理を行っていない初乳、母乳からの感染が示唆された。今回の大規模疫学調査により、本症の感染源、感染経路が初めて提示された。・薬剤感受性試験および試作ワクチンによる防除の検討使用全抗菌薬はgt2ではgt1に比較して低感受性を示した。Gt2の感受性結果は藻株の由来に関わらず一定であり、ゲンタマイシン、アムホテリシン-Bは感受性を示したが、乳汁への残留性から使用は困難であった。以上から、薬剤による本藻の治療は困難であることが確認された。そこで、不活化ワクチン株を作製、成牛および子牛に接種し、作製ELISAにより抗体価を測定し、防除の検討を行った。感染牛血清は、非感染牛と比較して有意に高い抗体価を示し、良好な再現性を得たことから、作製ELISAの有用性を確認した。さらにワクチン接種牛の抗体価を測定した結果、1.0 x 108 cells/mLの二回接種において、8週後までカットオフ値を超えた抗体価を確認した。以上からワクチンによる新たな防除の可能性を提示した。本研究成果は学術集会にて発表を行い、現在学術論文への投稿準備中である。

・プロトテカ性乳房炎の分子疫学調査プロトテカ感染牛乳汁160、バルク乳285、腸管内糞便821、飲料水478、他動物糞便4、体液（ルーメン、全血、尿）12、環境（ミルカー、牛床、飼料）89の計1849検体から分離および遺伝子解析を完了した。結果、乳汁サンプルのほとんどが病原遺伝子型とされるgenotype 2（gt2）と同定された。一方、環境サンプルは非病原遺伝子型とされるgenotype 1（gt1）が約70%、gt2が約30%と同定された。また、子牛糞便中からもgt2が検出された。以上から、感染源は腸管内糞便および乳汁であることが示唆され、それらからの汚染により拡大すること可能性が考えられた。また、子牛糞便から検出されたことから、殺藻処理を行っていない初乳、母乳からの感染が示唆された。今回の大規模疫学調査により、本症の感染源、感染経路が初めて提示された。・薬剤感受性試験および試作ワクチンによる防除の検討使用全抗菌薬はgt2ではgt1に比較して低感受性を示した。Gt2の感受性結果は藻株の由来に関わらず一定であり、ゲンタマイシン、アムホテリシン-Bは感受性を示したが、乳汁への残留性から使用は困難であった。以上から、薬剤による本藻の治療は困難であることが確認された。そこで、不活化ワクチン株を作製、成牛および子牛に接種し、作製ELISAにより抗体価を測定し、防除の検討を行った。感染牛血清は、非感染牛と比較して有意に高い抗体価を示し、良好な再現性を得たことから、作製ELISAの有用性を確認した。さらにワクチン接種牛の抗体価を測定した結果、1.0 x 108 cells/mLの二回接種において、8週後までカットオフ値を超えた抗体価を確認した。以上からワクチンによる新たな防除の可能性を提示した。本研究成果は学術集会にて発表を行い、現在学術論文への投稿準備中である。