細胞内　ＤＮＡ　センサーの同定と機能解析

细胞内DNA传感器的鉴定和功能分析

• 批准号: 13J01283
• 负责人: 茂谷 康
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J01283/
• 关键词: DNase II; STING; cGAMP

DNase II遺伝子ノックアウトマウスでは、未分解の内在性DNAがマクロファージ細胞内に大量に蓄積し、自然免疫応答の慢性的な活性化により関節リウマチを発症する。この自然免疫応答にはSTINGタンパク質が必須であるが、その分子機構は不明であった。そこで、STINGに注目して研究を行ったところ、細胞にDNAを導入するとSTINGが二量体化することを見出した。また、DNAを細胞内に導入した後の細胞抽出液を用意し、STINGタンパク質と試験管内で混合すると、STINGタンパク質の二量体化が誘導されることを発見した。これはDNA刺激後の細胞抽出液中にSTINGの二w量体化を誘導する因子が存在することを意味していた。この因子の性質を調べた結果、DNAやRNA、タンパク質でもない低分子の化合物であることが判明した。イオン交換カラムや疎水性カラムなどを用いてSTINGの二量体化因子を精製後LC-MSMS解析を行った結果、新規低分子化合物cGAMP (cyclic GMP-AMP)を同定することに成功した。cGAMPは、STINGに直接結合し二量体化を促すことで、下流の自然免疫応答を誘導するセカンドメッセンジャーであることが明らかとなった。さらにcGAMPを特異的かつ高感度に検出するアッセイ系を構築し、DNase IIノックアウトマウス組織中にcGAMPが存在する事を明らかにした。本研究は、新規セカンドメッセンジャーcGAMPが哺乳類の生体内において自己のDNAによって産生されることをを明らかにしたものであり、今後この新しい分子の生理作用を詳細に解析することにより自己免疫疾患等の病態解明や治療薬の開発につながることが期待される。

DNase II has a large amount of intracellular accumulation in the cells that have not been decomposed, and the natural immune response is chronic. The answer to the question of natural immunity is that it is necessary to prevent STING infection and that the molecular mechanism is unknown. STING and STING pay close attention to the research, and the cell DNA is used to quantify the output of the STING. After the intracellular injection of DNA and DNA, the extractive fluid was purposely extracted, the mixture was mixed in the tube, and the STING was quantified in the tube. After the stimulation of DNA, there was a dose response factor of STING in the extractive fluid of the cell, which meant that there was a dose of DNA. The results, DNA RNA, DNA RNA and low molecular weight compounds of low molecular weight compounds were identified. The results of LC-MSMS analysis were compared with those of cGAMP (cyclic GMP-AMP), a novel low molecular weight compound cGAMP (cyclic GMP-AMP). The results showed that the new low molecular weight compounds (LMCs) were successful. CGAMP and STING were directly combined with the two-dimensional method to promote the development of hepatitis, and the indecent ones were naturally immune to the disease. The high sensitivity of the special cGAMP system indicates that there is an error in the cGAMP in the organization that is sensitive to the information of the cGAMP. In this study, new rules and regulations are involved in the prevention and treatment of diseases such as immune diseases in mammalian animals, such as cGAMP, mammalian, mammal, mammary, mammal, mammal, mam

项目成果

新規セカンドメッセンジャーcyclic GMP-AMPによる自然免疫シグナル伝達機構

新型第二信使环 GMP-AMP 的先天免疫信号转导机制

• 发表时间: 2014
• 作者: 軽部皓介;服部泰佑;石田憲二;小松原武美;木村憲彰;川村悠人;井筒 弥那子;茂谷康
• 通讯作者: 茂谷康

徳島大学藤井節郎記念医科学センター細胞情報学分野ホームページ

德岛大学藤井节郎纪念医学中心细胞信息学系主页