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無顎類ヌタウナギにおける２種ビテロジェニン遺伝子の転写調節機構の解明

阐明无颌盲鳗中两个卵黄蛋白原基因的转录调控机制

基本信息

批准号：
13J01491
负责人：
西宮攻
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

一般に卵生脊椎動物の卵は、多量の卵黄を蓄積することを特徴とする。卵黄を構成する物質は、主にビテロジェニン（Vtg）と呼ばれる雌特異血清蛋白に由来する。そして、Vtgは、雌性ホルモンであるestradiol-17β（E2）の作用により肝臓で合成される。しかし、先行研究においてヌタウナギ（Eptatretus burgeri）では、Vtg遺伝子の発現は一般的な同遺伝子発現機構とは大きく異なる可能性が示された。そこで本研究ではヌタウナギにおけるVtg遺伝子の転写調節機構の解明を目的としており、本年度は以下の実験を行った。①ヌタウナギ肝臓片培養系を用いた2種Vtg遺伝子発現誘導実験本種の雄および成熟雌から得た肝臓片をE2（1 μM）添加した培養液、雌血清または成熟雄血清を含有した培養液を用いて1日または2日間培養した。培養後に各群の肝臓片中の2種Vtg遺伝子発現量をリアルタイム定量PCR法により測定した。その結果、両Vtg 遺伝子発現量は、何れの培養条件においても顕著な変化が認められなかった。本結果に加え、以前行ったin vivo実験においてもE2によるVtg遺伝子発現誘導が顕著に起こらなかったことから、ヌタウナギにおけるVtg遺伝子の発現制御はE2やエストロジェン受容体を介した経路を主要経路とせず、他のホルモンや転写調節因子等を介する可能性が強く示された。②Vtg合成に関わる転写調節因子の網羅的解析本種におけるVtg遺伝子の発現制御に関わる他のホルモンや転写調節因子等を探索するために、雌および雄の肝臓より得たmRNAを次世代シーケンサー（HiSeq 2000; illumina社）に供したトランスクリプトーム解析を試みた。その結果、Vtg遺伝子の発現に関わる因子の特定までには至らなかった。しかし、今後さらに解析を進める上での重要なコンティグデータベースを得ることができた。

In general, egg-laying vertebrae produce eggs, and a large amount of yolk is stored in the body. The egg yolk turns into a substance, and the main egg is called Vtg. The serum protein of the female is the origin of the disease. The effect of estradiol-17 β (E2) on liver synthesis was studied in mice, Vtg and female. In the first place, we should first study the possibility that the general health care system (Eptatretus burgeri) and the Vtg system will show that there is a significant difference in the possibility of developing large-scale medical institutions. The purpose of this study is to clarify the purpose of this study, and the following is required for the following year. In this study, we need to know that the purpose of this study is to clarify the purpose of this study. In this study, we will learn more about the Vtg system. 1. Two kinds of Vtg were used to induce this kind of mature female to get the liver tablet E2 (1 μ M) to add the culture solution and the female serum. the mature male serum containing the culture solution was incubated for 1 day and 2 days. After incubation, two kinds of Vtg in each group of liver tablets were measured by quantitative PCR method. The results of the experiment, the results of the Vtg test, the measurement of the conditions, and the conditions of the training system. As a result of this result, you can see that you can use the following information to control the performance of the in vivo system, such as the introduction of the main path, the introduction of the main path, and so on. In the previous line, you will be able to control the performance of the E2 system, the capacitor, the host, the host, the receiver, the recipient, the receiver, the receiver 2Vtg synthesizes the analysis of the network for writing factors. This Vtg sub-system is used to analyze other factors such as writing factors, and so on. Both male and female parents are successful in the next generation of mRNA (HiSeq 2000; illumina). It is intended to be used for the purpose of further analysis. The results of the Vtg test show that you can see that the factor is different from the specific one to the other. In the future, we will analyze the important information in the future. I will be glad to hear about it.