新興感染症＂Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ　ｓｉａｍｅｎｓｉｓ感染症＂の迅速診断法の開発

新发传染病“暹罗利什曼原虫感染”快速诊断方法的开发

• 批准号: 13F03090
• 负责人: 加藤 大智
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13F03090/
• 关键词: リーシュマニア; タイ; 診断; 血清診断

タイはリーシュマニア症の流行がない国であったが、2006年あたりから国外に出たことのないヒトで内臓型リーシュマニア症の発生が報告されるようになり、感染種は新種の原虫（2009年にLeishmania siamensisと命名され、後にL. siamensisとL. martiniquensisの2種の感染があることが判明）であることが明らかになった。病原体を媒介するサシチョウバエやリザーバーとなる動物の調査も行われているが、病原体の伝播機構や流行地域の広がり、ヒトや動物への潜在リスクなど、緊急に解明しなければならないことは多い。本研究は、イムノクロマト法を用いた迅速簡便かつ感度・特異性の高い抗L. siamensis, L. martiniquensis抗体の検出法を確立し、流行地域でのヒトの血清診断およびヒトやリザーバーの疫学調査へ応用することを目的とする。本年度の研究では、L. siamensisおよびL. martiniquensisからクローニングしたkinesin, hsp70, hsp83などの遺伝子から組換えタンパクを作製し、感染者血清や感染動物血清の抗原特異的な反応性を検討した。その結果、感染者や感染動物血清は、kinesinに対してより特異的に感度よく反応することが分かった。次に、L. siamensisおよびL. martiniquensisのkinesinの一部を抗原に用いたイムノクロマトのスティックを作製し、簡便かつ迅速な血清診断系の確立を試みた。これまでのところ、この検出系の感度と特異性が確認され、今後はさらなる感染者血清を用いて、本法の迅速血清診断法、スクリーニング系としての有用性を確認していきたいと考えている。一方で、タイでのリーシュマニア感染者にはHIVとの共感染も多くみとめられることから、抗体価の低い感染者も検出するためのより鋭敏な診断系へのさらなる改良も必要であると考える。

泰国是一个没有利什曼病流行病的国家，但2006年左右，内脏利什曼病开始发生在从未离开该国的人类中发生，并且据透露，传染性物种是一种新的原生动物（称为Leishmania siamensis，在2009年被称为Leishmania siamensis，两种物种都感染了siamensis and L. Mart.martiquiquiquiquique）。尽管正在对传播病原体和动物变为储层的沙脂进行研究，但仍需要迫切需要澄清许多事情，例如病原体传播的机制，特有区域的传播机制以及对人类和动物的潜在风险。这项研究旨在建立一种快速，简单，敏感和特定的方法来检测抗L。 siamensis和L. martiniquensis抗体使用免疫色谱法，并将其应用于流行地区的人类血清诊断以及人类和储层的流行病学研究。在今年的研究中，从锡安森氏乳杆菌和小硝基菌素的驱动蛋白，HSP70和HSP83等基因中制备了重组蛋白，并研究了感染和感染动物血清的抗原特异性反应性。结果，发现受感染的个体和感染动物血清对动力蛋白的反应更具体，更敏感。接下来，使用一部分锡安森氏乳杆菌和小硝基酮驱动蛋白作为抗原制备免疫色谱棒，并尝试建立一个简单而快速的血清诊断系统。到目前为止，已经确认了该检测系统的敏感性和特异性，我们希望使用更多的感染者的血清来确认该方法的有用性为快速的血清诊断方法和筛查系统。另一方面，由于许多感染了泰国利什曼尼亚的人也与艾滋病毒共同感染了，因此我们认为，对于发现具有低抗体滴度的感染者，需要进一步改进更敏感的诊断系统。