サシチョウバエ唾液成分を用いたリーシュマニア感染防御ワクチンの候補抗原の探索

利用白蛉唾液成分寻找预防利什曼原虫感染的疫苗候选抗原

• 批准号: 18780230
• 负责人: 加藤 大智
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780230/
• 关键词: ワクチン; 感染症; ベクター; 唾液; 免疫; リーシュマニア症; 寄生虫; サシチョウバエ

本研究は、ベクターであるサシチョウバエの唾液タンパクをリーシュマニア感染防御ワクチンとして応用するという新たな発想でのワクチン開発研究を行うことを目的とする。これまでの研究で、L.major「を媒介するサシチョウバエ P.duhoscqiの唾液タンパクのプロテオーム解析およびトランスクリプトーム解析を行い、唾液の主要構成タンパクを明らかにしてきた。この解析結果をもとに10種類程度の主要タンパクと、それらのうち抗原性にバリエーションがみられたものの、合計20種類程度の唾液タンパクをコードする遺伝子を哺乳類細胞タンパク発現ベクターに組込み、DNAワクチンを作製した。マウスの右耳をDNAワクチンで1週間おきに3回免疫し、最終免疫の1週間後、左耳に唾液腺抽出物をチャレンジ、細胞性免疫応答の指標であるDTHを測定した。また、液性免疫応答の指標として、唾液タンパクに対するIgG抗体応答を検討した。マウスに誘導される免疫応答を23種類の唾液タンパクについて検討した結果、それぞれの抗原の免疫原性に強弱が認められた。このうち、主要唾液成分でもある15, 32,42および44 kDaの唾液タンパクの免疫原性が高く、32 kDaのタンパクは液性免疫応答、42 kDaのタンパクは細胞性免疫応答、15 kDaおよび44 kDaのタンパクは両方の免疫応答を強く誘導することが明らかとなった。サシチョウバエ唾液成分に対する細胞性免疫応答がリーシュマニア感染防御効果をもたらすと考えられることから、15,42および44 kDaの唾液タンパクがワクチン候補抗原として考えられた。本研究で得られた結果は、ベクター唾液成分を用いた新たなワクチン開発に有用な知見をもたらすもので、今後は本成果をもとに、感染動物実験によりこのワクチンの有効性を検証していく必要があると考えられた。

这项研究旨在以新的想法进行疫苗开发研究，以将媒介的唾液蛋白（沼泽蝇）作为利什曼原虫感染预防疫苗。先前的研究表明，L. Major的“沼泽”是由L. Major介导的。 P. duhoscqi的唾液蛋白的蛋白质组分析和转录组分析揭示了唾液的主要成分蛋白。基于该分析的结果，将大约10种主要蛋白质和抗原性的变化变化，编码总共约20种唾液蛋白的基因被纳入哺乳动物细胞蛋白表达载体中以创建DNA疫苗。每周用DNA疫苗对小鼠的右耳进行三次免疫，在最终免疫后的一个星期，唾液腺提取物在左耳中受到挑战，DTH（DTH）测量了细胞介导的免疫反应的指标。此外，将IgG抗体对唾液蛋白的反应视为体液免疫反应的指数。通过检查小鼠对23种唾液蛋白的免疫反应的结果，观察到每种抗原的免疫原性。其中15个是主要的唾液成分。发现32,42和44 kDa唾液蛋白具有高度免疫原性，并且32 kDa蛋白会诱导体液免疫反应，42 kDa蛋白诱导细胞免疫反应，15和44 kDa蛋白诱导均可诱导免疫反应。由于唾液蝇中唾液成分中对唾液成分的细胞免疫反应被认为对利什曼原虫感染产生了保护作用，因此15,42和44 kDa唾液蛋白被认为是疫苗的候选抗原。这项研究中获得的结果为使用载体唾液成分开发新疫苗提供了有用的发现，人们认为，根据这些结果，将来必须通过对感染动物进行试验，必须根据这些结果来测试该疫苗的有效性。

项目成果

パキスタンにおける皮膚型リーシュマニア症のチトクロームb遺伝子多型と皮膚症状の関係

巴基斯坦皮肤利什曼病细胞色素b基因多态性与皮肤症状的关系

• 发表时间: 2007
• 作者: MYINT CH0MAR K;et. al.
• 通讯作者: et. al.

リーシュマニア原虫感染サシチョウバエの大量スクリーニング系の確立

利什曼原虫感染白蛉大规模筛查体系的建立

• 发表时间: 2007
• 作者: 加藤大智;他
• 通讯作者: 他

Gene Expression Changes Induced by type IV Allergy-Inducible Chemicals in Dendritic Cells

IV 型过敏诱导化学物质在树突状细胞中诱导的基因表达变化

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Vet Med Sci. 70(In press)
• 作者: Takagi;S.;高木哲;高木 哲;Tarama R
• 通讯作者: Tarama R

Differentiation of feline coronavirus type l and II infections by virus neutralization test.

通过病毒中和试验区分猫冠状病毒 l 型和 II 型感染。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Vet. Microbiol 124
• 作者: Takagi;S.;高木哲;高木 哲;Tarama R;Shiba N
• 通讯作者: Shiba N

ベクター唾液成分を用いたリーシュマニア感染防御ワクチンの開発に向けて

利用载体唾液成分开发预防利什曼原虫感染的疫苗

• 发表时间: 2007
• 作者: Takagi;S.;高木哲;高木 哲;Tarama R;Shiba N;Kato H;Myint CK;Barroso PA;Kato H;Kato H;Terayama Y;Taniguchi S;Kato H;Kato H;Barroso PA;Nishida T;Kato H;Marco JD;Adachi S;Calvopina M;Kato H;Barroso PA;加藤 大智;加藤 大智;MYINT CHOMAE;Barroso PA;加藤 大智;加藤 大智
• 通讯作者: 加藤 大智