癌幹細胞分化制御薬による膵臓癌根絶法の開発

使用癌症干细胞分化控制药物开发胰腺癌根除方法

基本信息

批准号：
13F03210
负责人：
栗崎晃
金额：
$ 1.47万
依托单位：
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13F03210/
关键词：
がん抗がん剤膵臓幹細胞癌分化化合物治療薬スクリーニング

项目摘要

平成２６年度は、本化合物についてin vitroでの有効性に加えてin vivoでの有効性についても検討した。in vitroでの解析については、すい臓がん幹細胞については必ずしもがんマーカーが確立されていない状況にあるが、他のがん幹細胞で示唆されている複数のがん幹細胞マーカーを指標に検証を進めた。その結果、我々の化合物はin vitroでがん幹細胞を抑制し、スフェアの形成を抑制する作用があることが示唆された。特に、処理時間や化合物の濃度に応じてスフェア形成能が抑制されること、スフェア中の各種がん幹細胞マーカーの遺伝子発現が定量的RT-PCRで低下するとともに、フローサイトメトリ―や免疫組織化学染色おいても発現減少が見られることが確認された。また、浸潤能を測定するスクラッチアッセイやトランスウエルを用いたマイグレーションアッセイについても有意に抑制されていた。以上のin vitroのデータを元に、さらに本化合物の有効性を検証するため、ヌードマウス皮下に移植したすい臓がん細胞の大きさを指標に、本化合物の有効性をin vivoで検証した。その結果、腫瘍サイズが、薬剤投与群で有意に低下し、Ki67陽性の増殖性細胞が減少すると共に、アポトーシスマーカー陽性の細胞が増加していた。また、腫瘍組織中で見られる血管新生も抑制されていることから、本化合物はすい臓がんにも有効と考えられた。現在、本化合物の作用機序について検討を進めている。

2014年，除了体外有效性外，该化合物还在体内进行了检查。关于体外分析，并不总是为胰腺癌干细胞建立癌症标志物，但是我们使用其他癌症干细胞建议的多个癌症干细胞标记作为指标进行了验证。结果表明，我们的化合物具有在体外抑制癌症干细胞并抑制球体形成的作用。特别是，已经证实，根据治疗时间和化合物的浓度抑制了形成球体的能力，并且通过定量RT-PCR降低了各种癌症干细胞标记的基因表达，并且在流式细胞仪和免疫组织化学染色下的表达也会降低。此外，还可以显着抑制使用Transwells的划痕和迁移测定。基于上述体外数据，为了进一步验证该化合物的有效性，该化合物的有效性在体内验证，使用植入裸鼠的胰腺癌细胞的大小，作为指数植入了裸鼠。结果，在药物治疗组中，肿瘤大小显着降低，ki67阳性增殖细胞降低，凋亡标记阳性细胞增加。此外，该化合物被认为在胰腺癌中有效，因为它也抑制了在肿瘤组织中看到的新血管化。目前，我们目前正在研究该化合物的作用机理。