Imaging, Protein Production, and Chemical Biology Core

核心A：成像，蛋白质生产和化学生物学核心 总结/摘要 成像，蛋白质生产和化学生物学核心的目标是最大限度地提高科学进步 通过提供必要的服务和试剂，提高PPG研究者的生产力。核心将执行三个 PPG的主要功能：（1）先进的光学和电子显微镜成像;（2）蛋白质和抗体 化学蛋白质组学。PPG的所有三个组成部分项目将利用至少两个核心服务， 其中两个项目将使用所有三个。 将这些活动集中在一个核心内将有利于方案规划补助金， 提高生产率并降低成本。核心将提供全方位服务的扫描和透射电子 显微镜、标准和活细胞共聚焦荧光显微镜和NanoSIMS成像。 后者是一 - 基于质谱的成像模式，其使得可以创建细胞的高分辨率图像， 仅仅根据同位素含量来判断组织。PPG研究者将使用NanoSIMS来可视化和量化 脂质在细胞和组织中的定位和移动。 PPG研究人员还将研究新的分子， 调节脂质转运和信号传导的新机制，其试剂很少。 协助这些 研究，核心将生产用于PPG研究的蛋白质和抗体试剂（例如， 可溶性GPIHBP 1， 稳定同位素标记的ALO-CD 4，5D2 Fab片段）。 最后，核心将执行基于活动的化学 蛋白质组学和同位素串联正交蛋白质水解酶活性-基于酶活性的蛋白质谱。这些最先进的技术 蛋白质组学发现平台将用于鉴定参与细胞内高密度脂蛋白转运的蛋白质 衍生的胆固醇和胆固醇对STING信号传导的调节。未来五年，核心是 具备丰富的经验、强大的协议和经验丰富的人员，为PPG提供重要服务 investigators.

Core A: Imaging, Protein Production, and Chemical Biology Core  SUMMARY/ABSTRACT  The goal of the Imaging, Protein Production, and Chemical Biology Core is to maximize the scientific progress  and productivity of PPG investigators by providing essential services and reagents. The core will perform three  major  functions  for  the  PPG:  (1)  advanced  light  and  electron  microscopy  imaging;;  (2)  protein  and  antibody  production;; and (3) chemical proteomics. All three PPG component projects will utilize at least two core services,  and  two  of  the  projects  will  utilize  all  three.  Centralizing  these  activities  within  a  core  will  benefit  the  PPG  by  increasing productivity and reducing costs. The core will provide full-­service scanning and transmission electron  microscopy,  standard  and  live-­cell  confocal  fluorescence  microscopy,  and  NanoSIMS  imaging.  The  latter  is  a  mass spectrometry–based imaging modality that makes it possible to create high-­resolution images of cells and  tissues based solely on their isotopic content. PPG investigators will use NanoSIMS to visualize and quantify the  localization  and  movement  of  lipids  in  cells  and  tissues.  PPG  investigators  will  also  study  new  molecules  and  novel  mechanisms  regulating  lipid  transport  and  signaling,  for  which  few  reagents  exist.  To  assist  these  investigations,  the  core  will  produce  protein  and  antibody  reagents  for  PPG  studies  (e.g.,  soluble  GPIHBP1,  stable  isotope–labeled  ALO-­D4,  5D2  Fab  fragments).  Finally,  the  core  will  perform  Activity-­Based  Chemical  Proteomics and isotopic Tandem Orthogonal Proteolysis‒Activity-­Based Protein Profiling. These state-­of-­the-­art  proteomics  discovery  platforms  will  be  used  to  identify  proteins  involved  in  the  intracellular  trafficking  of  HDL-­ derived  cholesterol  and  the  regulation  of  STING  signaling  by  cholesterol. For  the  next  five  years,  the  core  is  poised—with  the  experience,  robust  protocols,  and  experienced  personnel—to  provide  vital  services  to  PPG  investigators.