Imaging, Protein Production, and Chemical Biology Core

点击翻译按钮获取中文摘要

Core A: Imaging, Protein Production, and Chemical Biology Core  SUMMARY/ABSTRACT  The goal of the Imaging, Protein Production, and Chemical Biology Core is to maximize the scientific progress  and productivity of PPG investigators by providing essential services and reagents. The core will perform three  major  functions  for  the  PPG:  (1)  advanced  light  and  electron  microscopy  imaging;;  (2)  protein  and  antibody  production;; and (3) chemical proteomics. All three PPG component projects will utilize at least two core services,  and  two  of  the  projects  will  utilize  all  three.  Centralizing  these  activities  within  a  core  will  benefit  the  PPG  by  increasing productivity and reducing costs. The core will provide full-­service scanning and transmission electron  microscopy,  standard  and  live-­cell  confocal  fluorescence  microscopy,  and  NanoSIMS  imaging.  The  latter  is  a  mass spectrometry–based imaging modality that makes it possible to create high-­resolution images of cells and  tissues based solely on their isotopic content. PPG investigators will use NanoSIMS to visualize and quantify the  localization  and  movement  of  lipids  in  cells  and  tissues.  PPG  investigators  will  also  study  new  molecules  and  novel  mechanisms  regulating  lipid  transport  and  signaling,  for  which  few  reagents  exist.  To  assist  these  investigations,  the  core  will  produce  protein  and  antibody  reagents  for  PPG  studies  (e.g.,  soluble  GPIHBP1,  stable  isotope–labeled  ALO-­D4,  5D2  Fab  fragments).  Finally,  the  core  will  perform  Activity-­Based  Chemical  Proteomics and isotopic Tandem Orthogonal Proteolysis‒Activity-­Based Protein Profiling. These state-­of-­the-­art  proteomics  discovery  platforms  will  be  used  to  identify  proteins  involved  in  the  intracellular  trafficking  of  HDL-­ derived  cholesterol  and  the  regulation  of  STING  signaling  by  cholesterol. For  the  next  five  years,  the  core  is  poised—with  the  experience,  robust  protocols,  and  experienced  personnel—to  provide  vital  services  to  PPG  investigators.