STRUCTURAL ANALYSIS OF MACROMOLECULAR ASSEMBLIES

大分子组装体的结构分析

基本信息

  • 批准号:
    2175413
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 28.39万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    1982
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1982-04-01 至 1997-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

The long-term objective of this project is to develop methods of structural and functional studies for macromolecular assemblies in single-particle (noncrystalline) form, using low-dose electron microscopy of frozen-hydrated samples. Existing successful methods of alignment, classification, and reconstruction developed in the principal investigator's laboratory will be extended toward higher resolution, with 10 A being set as a nominal goal. Several collaborations with leading investigators will provide expertise in technical areas of supply material for research. Specifically, the following technical development efforts will be made: (i) transfer function correction, and clarification of the role of inelastic scattering; (ii) refinement of data merging and reconstruction methods -- merging of projection data is analogous to the merging of data in electron crystallography, except that the orientation must also be refined; (iii) development of spot scanning, digital readout and diagnosis to improve the yield of cryo-experiments and efficiency of data collection; (iv) further exploration of restoration, by the method of projection onto convex sets (POCS), to eliminate the missing data cone in the random-conical reconstruction; (v) development of 2D and 3D image modeling, to simulate the action of the electron microscope and predict images observed for models proposed, e.g. for ribosomal RNA. This will allow comparison between experimental and theoretical data. The specific structural and functional studies proposed focus on the Escherichia coli and the mammalian ribosome. These studies promise to unravel some of the steps in the mechanism of protein synthesis which are of central importance in understanding the action of certain antibodies in bacterial diseases and the action of potent toxins. t-RNA, factor and antibody mapping will be used in three dimensions to obtain information on the translation process. Other systems that will be investigated in collaboration with a French laboratory are hemocyanin and human alpha-2 macroglobulin.
该项目的长期目标是制定方法, 大分子组装体的结构和功能研究 单颗粒(非结晶)形式,使用低剂量电子显微镜 冷冻水化样本 现有的成功的对齐方法, 分类和重建的原则, 研究人员的实验室将向更高的分辨率扩展, 10 A被设定为名义目标。 与领先的几个合作 调查员将提供供应技术领域的专门知识 研究的材料。 具体而言,将作出以下技术开发努力: (i)传递函数的修正,并澄清的作用 非弹性散射;(ii)数据合并和重建的细化 方法-投影数据的合并类似于数据的合并 在电子晶体学中,除了方向也必须是 改进; ㈢发展点扫描、数字读出和 诊断,以提高低温实验的产量和数据的效率 (四)进一步探索修复方法, 凸集投影(POCS),以消除丢失的数据锥 在随机圆锥重建中;(v)2D和3D图像的开发 建模,以模拟电子显微镜的作用并预测 为提出的模型观察到的图像,例如核糖体RNA。 这将 允许实验和理论数据之间的比较。 具体的结构和功能研究建议集中在 大肠杆菌与哺乳动物核糖体。 这些研究承诺, 解开蛋白质合成机制中的一些步骤, 对于理解某些抗体的作用至关重要 细菌性疾病和强效毒素的作用。 t-RNA、因子和 将在三维中使用抗体绘图来获得信息 在翻译过程中。 将在以下方面调查的其他系统 与法国实验室的合作是血蓝蛋白和人类α-2 巨球蛋白

项目成果

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专著数量(0)
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专利数量(0)

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