T SPECIFIC DNA BINDING PROPERTIES OF A HUMAN PROTEIN
人类蛋白质的特定 DNA 结合特性
基本信息
- 批准号:2734707
- 负责人:
- 金额:$ 20.87万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:1991
- 资助国家:美国
- 起止时间:1991-08-01 至 2001-06-30
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:DNA footprinting chemical binding complementary DNA cytokine receptors gene induction /repression genetic promoter element human genetic material tag interleukin 2 intermolecular interaction nonhistone nucleoprotein nucleosomes polymerase chain reaction site directed mutagenesis tissue /cell culture
项目摘要
DESCRIPTION: The HMG-I(Y) group of mammalian "high mobility group" (HMG)
chromatin proteins are in vivo regulators of gene expression and founding
members of a new class of nonhistone proteins called 'architectural
transcription factors'. The investigator has demonstrated in human T cells
that HMG-I(Y) proteins participate, along with transcription factors NF-kB,
Elf-1 and SRF, in the initial in vivo transcription induction of the
interleukin-2 receptor a-chain gene (IL-2Ra), an essential controlling step
in mounting an effective immune reaction. The goals of the proposed
research are to elucidate, at the molecular/mechanistic level, how different
regions of the HMG-I(Y) protein function in the transcriptional regulation
of the IL-2Ra gene promoter. The investigator has produced a large number
of both variant HMG-I(Y) proteins and mutant IL-2Ra promoter DNAs for use in
both in vitro and in vivo investigations of the protein-DNA complexes formed
on the IL-2Ra promoter during transcriptional activation. The Specific Aims
of the research are to use these mutant proteins and promoter DNAs to: 1)
Determine the relative importance of different peptide domains of the
HMG-I(Y) protein in the formation of a looped, stereospecific activation
complex on the promoter of the human IL-2Ra gene and investigate the
molecular events involved in such complex formation in vitro and in vivo.
2) Determine the effects of site-specific HMG-I(Y) protein phosphorylations
on protein-protein and protein-DNA interactions during promoter complex
formation in vitro and in vivo. 3) Investigate the role played by HMG-I(Y)
protein-induced alterations of the nucleosomal chromatin structure of the
IL-2Ra promoter region during gene transcriptional activation in vitro and
in vivo. A variety of extremely sensitive and quantitative biochemical,
biophysical, and biological techniques will be employed to analyze the
ability of mutant HMG-I(Y) proteins to participate in IL-2Ra promoter
complex formation and function. Results from these experiments will
contribute significant new information concerning the regulated expression
of the IL-2Ra gene, one of the rate limiting steps in T cell activation
during induction of the immune response.
描述:哺乳动物高迁移率族(HMG)的HMG-I(Y)群
染色质蛋白是基因表达和建立的体内调节因子
一类新的非组蛋白的成员,称为‘建筑’
转录因子。研究人员已经证明,在人类T细胞中
HMG-I(Y)蛋白与转录因子NF-kB一起参与,
ELF-1和SRF,在体内转录的初始诱导
白细胞介素2受体a链基因(IL-2ra)--一个重要的调控步骤
在建立有效的免疫反应方面。建议的目标是
研究是要在分子/机制层面上阐明
HMG-I(Y)蛋白在转录调控中的功能区域
IL-2ra基因启动子。调查员拿出了一大批
变异型HMG-I(Y)蛋白和突变型IL-2ra启动子DNA在临床中的应用
蛋白质-DNA复合体的体内外研究
转录激活过程中对IL-2ra启动子的影响。具体目标
研究的目的是使用这些突变蛋白和启动子DNA来:1)
确定不同多肽结构域的相对重要性
HMG-I(Y)蛋白在形成环状、立体特异性激活中的作用
人IL-2ra基因启动子上的复合体
分子事件参与了体外和体内这种复合体的形成。
2)确定位点特异性HMG-I(Y)蛋白磷酸化的影响
启动子复合体中蛋白质-蛋白质和蛋白质-DNA相互作用的研究
在体外和体内形成。3)调查HMG-I所起的作用(Y)
蛋白质诱导的核小体染色质结构的改变
IL-2ra启动子区域在体外基因转录激活中的作用
在活体内。各种极其灵敏和定量的生化,
生物物理学和生物技术将被用来分析
突变型HMG-I(Y)蛋白参与IL-2ra启动子的能力
复杂的形态和功能。这些实验的结果将
提供有关受调控表达的重要新信息
IL-2ra基因,T细胞活化的限速步骤之一
在免疫反应的诱导过程中。
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
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