TYPE II COLLAGEN ISOFORMS IN CRANIOFACIAL SKELETOGENESIS

颅面骨骼发育中的 II 型胶原蛋白异构体

基本信息

  • 批准号:
    2897101
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 11.76万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1996-05-01 至 2001-04-30
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

DESCRIPTION (Adapted from the Applicant's Abstract): The overall goal of this R29 application is to understand whether differential expression of alternatively spliced type II procollagen isoforms is necessary for the normal development of craniofacial cartilage and bone. Previous work by the Principal Investigator in the chick, and by others in different species, has shown that the type II collagen gene encodes two isoforms of mRNA that are the result of alternative splicing and that are expressed differentially during skeletogenesis. One form (IIA) includes exon 2 that encodes a cysteine-rich globular domain of the amino (N)-propeptide and is expressed in prechondrogenic mesenchyme and embryonic calvaria at low levels. The type IIB gene excludes exon 2, and is expressed at high levels by well-differentiated chondrocytes. The change in splicing pattern during chondrogenesis is accompanied by markedly increased type II collagen mRNA levels resulting in deposition of type II collagen-containing cartilage matrix. The proposed studies will address the hypotheses that (1) the cysteine-rich globular domain of type IIA procollagen functions in maintaining low levels of type II collagen synthesis in embryonic calvaria as well as prechondrogenic mesenchyme by a negative feedback mechanism, and thus splicing out of this domain is a necessary step for upregulation of type II collagen synthesis during cartilage formation, and (2) type IIA procollagen regulates fibrillogenesis in embryonic calvaria by forming heterotypic fibrils with type I collagen. The specific aims are: (1) To investigate the role of the alternatively spliced cysteine-rich globular domain in regulation of type II collagen production in chondrocytes and calvarial cells; (2) To define the role of type IIA procollagen in fibrillogenesis in developing calvaria; and (3) To analyze the effects of targeted overexpression of type IIA procollagen N-propeptide and abrogation of type IIA procollagen in the developing craniofacial skeleton of chick embryos using replication-competent retroviral (RCAS) constructs. These studies should strengthen our understanding of normal and abnormal development of the craniofacial skeleton.
描述(改编自申请人的摘要): 这个R29应用程序是为了了解是否差异表达的 选择性剪接的II型前胶原同种型是必需的, 颅面软骨和骨骼的正常发育。 以前的工作 小鸡的主要研究者,以及其他不同物种的研究者, 显示II型胶原基因编码两种mRNA亚型, 选择性剪接的结果和差异表达 在骨骼形成过程中。 一种形式(IIA)包括编码多核苷酸的外显子2。 氨基(N)-前肽的富含半胱氨酸的球状结构域,并表达 在软骨形成前间充质和胚胎颅骨中含量较低。 的 IIB型基因不包括外显子2,并且通过以下途径以高水平表达: 分化良好的软骨细胞。 拼接模式的变化, 软骨形成伴随着II型胶原mRNA的显著增加 导致含II型胶原软骨沉积的水平 矩阵 拟议的研究将解决以下假设:(1) IIA型前胶原富含半胱氨酸的球状结构域在 维持胚胎颅骨中低水平的II型胶原合成 以及通过负反馈机制的前软骨形成间充质,和 因此剪接出该结构域是上调 软骨形成过程中II型胶原合成,和(2)IIA型 前胶原通过形成纤维来调节胚胎颅盖骨中的纤维形成 I型胶原的异型原纤维。 具体目标是:(1) 研究选择性剪接的富含半胱氨酸的球状体 结构域调节软骨细胞中II型胶原蛋白的产生, (2)明确IIA型前胶原在颅顶细胞中的作用, (3)分析不同发育阶段颅骨纤维形成的影响。 IIA型前胶原N-前肽的靶向过表达和消除 Ⅱ A型前胶原在鸡颅面骨骼发育中的表达 使用复制能力逆转录病毒(RCAS)构建体的胚胎。 这些 研究应该加强我们对正常和异常的理解 颅面骨骼的发育。

项目成果

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