FUNCTIONAL MAPPING OF NICOTINIC RECEPTOR BINDING SITES

烟碱受体结合位点的功能图谱

基本信息

项目摘要

DESCRIPTION (adapted from applicant's description): The aim of this proposal is to develop a dynamic structural model of the nicotinic acetylcholine receptor (AChR) agonist binding site by combining mutagenesis of the receptor with functional and biochemical analysis. The application of molecular biological techniques to studies of the nicotinic receptor has resulted in significant advances in the understanding of the relationship between receptor structure and function. For example, the regions of the receptor responsible for acetylcholine binding and the region which forms the ion channel proper have been identified. The task now is to understand how these regions interact to generate the functional response. Where are the specific contact points between acetylcholine and the binding domain? What are the physical changes in the protein that occur upon binding which ultimately lead to the opening of the ion channel? By using a panel of genetically modified receptors in which sites for chemical modification have been introduced throughout the binding domain, the roles of individual residues will be examined. Biochemical analysis will yield information on the accessibility of residues and secondary structure of the binding site. Protein conformational changes will also be monitored by examining acetylcholine-dependent differences in chemical modification. Overall the goal of this work is to enhance understanding of the specific mechanisms of acetylcholine action and to provide information applicable to studies of other ligand-activated ion channels.
描述(改编自申请人的描述):本申请的目的 建议是开发一个动态结构模型的尼古丁 乙酰胆碱受体(AChR)激动剂结合位点 通过功能和生物化学分析对受体进行诱变。 分子生物学技术在植物病原体研究中的应用 烟碱受体导致了在 了解受体结构与 功能 例如,受体的区域负责 乙酰胆碱结合和形成离子通道的区域 已被确认。 现在的任务是了解这些区域 相互作用以产生功能性反应。 具体在哪里 乙酰胆碱和结合域之间的接触点 是什么 蛋白质在结合时发生的物理变化, 最终导致离子通道的开放 通过使用一组 基因修饰受体中的化学修饰位点 已经在整个绑定域中引入, 将检查单个残留物。 生化分析会得出 的残基和二级结构的可及性的信息 结合位点。 还将监测蛋白质构象变化 通过检查化学物质中乙酰胆碱依赖性的差异 改性 总的来说,这项工作的目标是增进了解, 乙酰胆碱作用的具体机制,并提供 适用于其他配体活化离子研究信息 渠道

项目成果

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