HIGH CONFIDENCE PROTEIN IDENTIFICATION OF PROTEIN ISOLATED BY SDS-PAGE

通过 SDS-PAGE 分离蛋白质的高置信度蛋白质鉴定

• 批准号: 6307620
• 负责人: Salvatore Sechi
• 金额: $ 0.82万
• 依托单位: ROCKEFELLER UNIVERSITY
• 依托单位国家: 美国
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 美国
• 起止时间: 1999-12-01 至 2000-11-30
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://reporter.nih.gov/project-details/6307620
• 关键词: biomedical resource; genome; proteins; spectrometry; technology /technique

Peptide mapping by MALDI has been long used for protein identification of protein isolated by SDS-PAGE. For an efficient peptide mapping and consequent extraction of peptides containing cysteine we have investigated the use of several alkylating agents. Furthermore, we have shown that the use of labeled agents or the simultaneous use of two alkylating reagents allowed the identification of peptides containing cysteines among all the tryptic peptides. This information can be used to constrain the search in the data base if the protein is unknown. The methodology was applied and show to work with selected proteins. We are now in the process of applying this methods for the identification of proteins purified from the nuclear envelope.

用MALDI绘制多肽图长期以来一直被用于蛋白质 用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定分离蛋白。为实现高效的 多肽图谱及其提取方法研究 半胱氨酸我们研究了几种烷基化试剂的用途。 此外，我们已经证明，使用标记的代理或 同时使用两种烷基化试剂可以进行鉴定 在所有胰蛋白酶多肽中含有半胱氨酸的多肽。这 如果满足以下条件，则可以使用信息来限制数据库中的搜索 这种蛋白质是未知的。该方法得到了应用，并显示了良好的效果 与选定的蛋白质结合。我们现在正在应用这一点 从细胞核中提纯的蛋白质的鉴定方法 信封。