TRANSLATIONAL CONTROL OF ONCOPROTEIN MDM2 SYNTHESIS

癌蛋白 MDM2 合成的翻译控制

基本信息

  • 批准号:
    6376271
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 22.8万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1999-07-01 至 2004-04-30
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Oncoprotein MDM2 is a component of a negative feedback loop that regulates the activity and cellular level of tumor suppressor p53. The synthesis of MDM2 is regulated at the translational level in resting fibroblasts that are activated to reenter the cell cycle. In one class of soft tissue tumors, synthesis of MDM2 protein is enhanced by one to two orders of magnitude without a corresponding increase in mRNA level. In all cell types examined, there are two forms of mdm2 mRNA. The long form (L-mdm2) contains a 287-nucleotide 5' leader, with two upstream open reading frames (uORFs), derived from exon 1 and the short form (S-mdm2) has a 64-nucleotide leader arising from exon 2. L-mdm2 is inefficiently loaded with ribosomes in normal fibroblasts, HeLa cells and choriocarcinoma cells. The L-mdm2 leader confers inefficient ribosome loading on a reporter gene and the two uORFs cooperate synergistically to suppress translation. In the choriocarcinoma cell line, in which MDM2 expression is translationally derepressed, the synergistic interaction between the uORFs in the L-mdm2 leader is lost. The S-mdm2 mRNA is well loaded with ribosomes in the choriocarcinoma cells, but is poorly translated in normal fibroblasts and HeLa cells. Fusion constructs containing the S-mdm2 leader are well translated in all cell types, suggesting that the translational suppression in normal cells requires another element in part of the mRNA other than the 5' leader. This application proposes a series of experiments designed to define the mechanisms of translational control of the mdm2 gene in normal and neoplastic cells. The synergistic interaction between the two uORFs in L-mdm2 is of particular interest, first because it is lost in tumor cells that overexpress MDM2 protein and, second, because there is no mammalian model that is readily accessible for experimental study of the mechanism of regulation by multiple, interacting uORFs. By analogy to the regulation by multiple uORFs in the yeast GCN4 gene, the possible involvement of phosphorylation of eIF-alpha in regulation of MDM2 translation will be tested. The sequences in the S-mdm2 mRNA that are responsible for the differences in its translation between normal and tumor cells will also be defined.
肿瘤蛋白MDM2是调节肿瘤抑制因子p53活性和细胞水平的负反馈回路的一个组成部分。在静止的成纤维细胞中,MDM2的合成在翻译水平上受到调节,这些成纤维细胞被激活重新进入细胞周期。在一类软组织肿瘤中,MDM2蛋白的合成增加了一到两个数量级,而mRNA水平却没有相应的增加。在所检测的所有细胞类型中,mdm2 mRNA有两种形式。长型(L-mdm2)包含一个287个核苷酸的5'先导体,有两个上游开放阅读框(uorf),来自外显子1,短型(S-mdm2)有一个64个核苷酸的先导体,来自外显子2。在正常成纤维细胞、HeLa细胞和绒毛膜癌细胞中,L-mdm2装载核糖体的效率较低。L-mdm2引线使报告基因上的核糖体装载效率低下,两个uorf协同合作抑制翻译。在MDM2表达被翻译抑制的绒毛膜癌细胞系中,L-mdm2先导蛋白中uorf之间的协同相互作用丧失。S-mdm2 mRNA在绒毛膜癌细胞中与核糖体装载良好,但在正常成纤维细胞和HeLa细胞中翻译不良。包含S-mdm2引线的融合构建体在所有细胞类型中都可以很好地翻译,这表明正常细胞中的翻译抑制需要mRNA中除5'引线外的另一个元件。本应用程序提出了一系列的实验,旨在确定mdm2基因在正常和肿瘤细胞中的翻译控制机制。L-mdm2中两种uORFs之间的协同相互作用特别令人感兴趣,首先是因为它在过度表达MDM2蛋白的肿瘤细胞中丢失,其次是因为没有哺乳动物模型可以容易地用于实验研究多种相互作用的uORFs调节机制。通过类比酵母GCN4基因中多个uorf的调控,我们将检验eif - α磷酸化是否参与了MDM2翻译的调控。S-mdm2 mRNA中负责正常细胞和肿瘤细胞之间翻译差异的序列也将被定义。

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

DAVID R MORRIS其他文献

DAVID R MORRIS的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('DAVID R MORRIS', 18)}}的其他基金

Application of RiboTag-seq to Exploration of Tumor Microenvironments
RiboTag-seq在肿瘤微环境探索中的应用
  • 批准号:
    7852730
  • 财政年份:
    2009
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
Application of RiboTag-seq to Exploration of Tumor Microenvironments
RiboTag-seq在肿瘤微环境探索中的应用
  • 批准号:
    7943953
  • 财政年份:
    2009
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
Functions of the FMRP Isoforms
FMRP 同工型的功能
  • 批准号:
    7707256
  • 财政年份:
    2008
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
Cell-specific Transcript Profiling in Complex Tissues
复杂组织中的细胞特异性转录谱分析
  • 批准号:
    7295761
  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
Cell-specific Transcript Profiling in Complex Tissues
复杂组织中的细胞特异性转录谱分析
  • 批准号:
    7196773
  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
SCHMOO FORMATION MODIFIED BY MISEXPRESSION OF ORF OF UNKNOWN FUNCTION
未知功能的 ORF 错误表达修饰的 SCHMOO 结构
  • 批准号:
    7182343
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
GENE EXPRESSION ANALYZED BY HIGH-RESOLUTION STATE ARRAY ANALYSIS AND QUANTITATI
通过高分辨率状态阵列分析和定量分析基因表达
  • 批准号:
    6979582
  • 财政年份:
    2004
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
DEVELOPMENT OF TRANSLATION STATE ARRAY ANALYSIS
平移状态数组分析的发展
  • 批准号:
    6498013
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
DEVELOPMENT OF TRANSLATION STATE ARRAY ANALYSIS
平移状态数组分析的发展
  • 批准号:
    6287917
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
DEVELOPMENT OF TRANSLATION STATE ARRAY ANALYSIS
平移状态数组分析的发展
  • 批准号:
    6619630
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:

相似海外基金

NOVEL RNASE PROTECTION ASSAY FOR CYTOKINE MRNAS
细胞因子 MRNAS 的新型 RNA 酶保护测定
  • 批准号:
    6317727
  • 财政年份:
    2000
  • 资助金额:
    $ 22.8万
  • 项目类别:
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了