LATERAL ORGANIZATION OF EPITHELIAL CELL SURFACES

上皮细胞表面的横向组织

基本信息

  • 批准号:
    6564272
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 14.67万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2002-01-01 至 2002-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Epithelial cells, which comprise 50% of all cells in the body [and account for 90% of all human cancers] have as a defining function the creation and maintenance of physiological compartments of the body. They are functionally and morphologically polarized in order to perform this function. Lipid-anchored proteins, GPI=proteins and glycosphingolipids are concentrated at the apical surfaces of most polarized epithelial cells. We propose to use biophysical techniques to study the formation, and organization of the sorting units for GPI-proteins in the Golgi and plasma membranes and to compare the sorting units in MDCK cells, in which GPI-proteins are delivered directly to the apical surface, and in WIF-B hepatocytes, in which apical proteins take an indirect route to the apical surface. We will also compare the lateral organization of different GPI-proteins in MDCK cells and in liposomes. The following questions will be address: 1) How are GPI-proteins and GSL concentrated and segregated from other proteins in the Golgi? 2) What are the cell & protein specificities of the clustering and polarity of GPI-proteins in cells grown in complete medium and abolish their polarity in cells deprived of LDL? Our techniques to address these questions include fluorescence photo bleaching and recovery, FPR, fluorescence loss in photo bleaching, FLIP, and imaging fluorescence resonance energy transfer, FRET.
上皮细胞,占体内所有细胞的 50% [和 占所有人类癌症的 90%] 具有定义功能 身体生理区室的创建和维护。 它们在功能和形态上两极分化,以便 执行此功能。 脂质锚定蛋白,GPI=蛋白质和 鞘糖脂集中在大多数细胞的顶端表面 极化的上皮细胞。 我们建议使用生物物理 研究排序的形成和组织的技术 高尔基体和质膜中 GPI 蛋白的单位 比较 MDCK 细胞中的分选单位,其中 GPI 蛋白是 直接递送至顶端表面,并在 WIF-B 肝细胞中, 其中顶端蛋白质采取间接途径到达顶端 表面。 我们还将比较不同的横向组织 MDCK 细胞和脂质体中的 GPI 蛋白。 以下问题 将讨论:1) GPI 蛋白和 GSL 如何浓缩和 与高尔基体中的其他蛋白质分离? 2)什么是细胞& GPI 蛋白质的聚类和极性的蛋白质特异性 在完全培养基中生长的细胞中并消除细胞中的极性 剥夺低密度脂蛋白? 我们解决这些问题的技术包括 荧光光漂白和恢复、FPR、荧光损失 光漂白、FLIP 和成像荧光共振能量 转移,烦恼。

项目成果

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