Probing neural precursor diversity with phage display derived scFv antibodies
使用噬菌体展示衍生的 scFv 抗体探索神经前体多样性
基本信息
- 批准号:7085069
- 负责人:
- 金额:$ 17.55万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:2006
- 资助国家:美国
- 起止时间:2006-04-15 至 2008-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
DESCRIPTION (provided by applicant): The rapid progress in our ability to isolate different stem cell and progenitor cell populations from the central nervous system has opened up the door to promising new avenues for the diagnosis and therapy of diseases of the CNS. These advances depend critically on the use of specific markers that allow us to distinguish between both developmentally and functionally related cell types. Using the limited number of cell type specific markers currently available, it has been possible to identify a number of key principles governing lineage relationships within the CNS. However, lineage studies also suggest that a much greater degree of cell diversity exists, that lies beyond the purview of markers available today. Here we propose to systematically develop a library of markers that can be used to identify and purify distinct neural cell populations with unprecedented specificity. To achieve this, we will combine our ability to isolate CNS precursor populations with the power of Phage Display technology. Through in vitro selection of single chain antibody clones that bind to the surface of isolated neural cells, we will specifically select for reagents that can be used for expression analysis in live cells. This protocol will allow rapid screening of large numbers of clones while avoiding problems inherent to procedures requiring the immunization of animals. Our plan of research will focus on the isolation of markers labeling 2 specific CNS populations: early glial progenitors and distinct populations of astrocytes. There are currently no markers that allow a positive identification of distinct stages of glial precursor differentiation. Isolating such markers will allow us to discern between oligodendroglial and astroglial precursors, as well as between progressive states of lineage restriction and proliferative potential, as observed in glial precursors from different regions of the CNS. Similarly, while GFAP continues to be used as the 1 defining marker of astrocytes, it is clear that astrocytic phenotypes can vary dramatically between astrocytes found during development, in acute lesions or in glial scar tissue. Preliminary data using glial progenitors strongly support the feasibility of this novel approach. Lay statement: The proposed research aims to generate new tools that will allow a better identification of different types of stem cells and their offspring in the brain. These tools will also help in developing better diagnostics and treatments for diseases affecting the brain.
描述(由申请人提供):我们从中枢神经系统分离不同干细胞和祖细胞群体的能力取得了快速进展,为中枢神经系统疾病的诊断和治疗打开了一扇门。这些进展在很大程度上取决于特定标记的使用,这些标记允许我们区分发育和功能相关的细胞类型。利用目前可用的有限数量的细胞类型特定标记,已经有可能确定管理中枢神经系统内的谱系关系的一些关键原则。然而,谱系研究也表明,存在更大程度的细胞多样性,这超出了当今可用的标记的范围。在这里,我们建议系统地开发一个标记库,可以用来识别和纯化具有前所未有的特异性的不同的神经细胞群体。为了实现这一目标,我们将把我们分离CNS前体种群的能力与噬菌体展示技术的力量结合起来。通过体外筛选与分离的神经细胞表面结合的单链抗体克隆,我们将专门筛选可用于活细胞表达分析的试剂。该方案将允许对大量克隆进行快速筛选,同时避免要求动物免疫的程序所固有的问题。我们的研究计划将专注于分离标记两个特定中枢神经系统群体的标记:早期神经胶质前体细胞和不同的星形胶质细胞群体。目前还没有一个标记物可以肯定地识别神经胶质前体分化的不同阶段。分离这些标记将使我们能够区分少突胶质前体和星形胶质前体,以及谱系限制和增殖潜力的进展状态,就像在中枢神经系统不同区域的胶质前体观察到的那样。同样,尽管GFAP仍然被用作星形胶质细胞的1个定义标记物,但很明显,在发育过程中发现的星形胶质细胞、急性皮损或胶质瘢痕组织中的星形胶质细胞表型可能有很大差异。使用神经胶质前体细胞的初步数据有力地支持了这种新方法的可行性。Lay声明:这项拟议的研究旨在产生新的工具,使人们能够更好地识别大脑中不同类型的干细胞及其后代。这些工具还将有助于为影响大脑的疾病开发更好的诊断和治疗方法。
项目成果
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专著数量(0)
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