Subproject 4 Antimicrobials and Efflux Pumps in Staphylococcus aureus Infection

总结 该项目的长期目标是确定金黄色葡萄球菌的全部外排泵 有助于多种抗菌素耐药性并阐明其表达的决定因素， 它们在微生物生理学中的作用以及它们在感染中对细菌对抗微生物剂的反应的影响。 的 工作将集中在调控元件的遗传分析和细菌的适应性和对 在皮下脓肿模型中使用抗菌剂，与其他项目组合作评估 新的抗微生物化合物在乳腺癌中的功效以及外排泵对其影响的程度 功效 具体目的有四：1）分析S.金黄色葡萄球菌， 对已确定的抗菌剂和P01鉴定的新型化合物敏感性的影响 合作者; 2）分析脓肿环境中生理泵过度表达的影响， 对抗菌剂的治疗反应，重点关注Tet 38泵和四环素治疗; 3） 剖析影响阻力流出泵表达的调控网络， 由步行者实验室开发的多重文库;和4）测试来自P01合作者的新化合物， 在哺乳动物感染和生物膜模型中的有效性，并评估脓肿中的兼职模型 模型这项工作将利用遗传操作和等位基因交换在S。金黄色葡萄球菌，基因测量 表达，并建立感染的小鼠模型（皮下脓肿，肾脓肿， 脓肿，致死性），利用基因组定义的耐甲氧西林菌株和其他S.金黄色。的 该计划项目的总体目标是采取一个良好的综合，多学科的方法， 了解抗生素耐药性的发展和传播，并将这一努力与 寻找破坏耐药病原体的化合物，包括耐甲氧西林的S。 金黄色 （MRSA），通过抑制新的目标和途径。 这个项目将增加对耐药性的理解 并提供用于测试这种泵的作用的菌株 对新靶点和途径有活性的新型化合物。 它还将利用哺乳动物模型， 常见的MRSA感染以测试化合物的体内活性。

Summary  The longterm goals of the project are to identify the full array of efflux pumps of Staphylococcus aureus  that contribute to multiple antimicrobial resistance and to elucidate the determinants of their expression,  their role in microbial physiology and their effect on bacterial response to antimicrobials in infection.  The  work  will  focus  on  genetic  analysis  of  regulatory  elements  and  on  bacterial  fitness  and  response  to  antimicrobials  in  a  subcutaneous  abscess  model,  collaborating  with  other  project  groups  to  assess  the  efficacy of novel antimicrobial compounds in abscesses and the extent to which efflux pumps affect that  efficacy.  There are four specific aims: 1) analyze the global array of efflux pumps of S. aureus for their  effects  on  susceptibility  to  established  antimicrobials  and  novel  compounds  identified  by  P01  collaborators; 2) analyze the effects of physiologic pump overexpression in the abscess environment and  on  treatment  response  to  antimicrobials  with  focus  on  the  Tet38  pump  and  tetracycline  treatment;  3)  dissect  the  regulatory  networks  affecting  resistance  effux  pump  expression  using  the  high‐efficiency  multiplex libraries developed by the Walker lab; and 4) test novel compounds from P01 collaborators for  efficacy  in  mammalian  infection  and  biofilm  models  and  assess  the  moonlighting  model  in  the  abscess  model. The work will utilize genetic manipulation and allelic exchange in S. aureus, measurements of gene  expression  with  RT‐PCR,  and  established  murine  models  of  infection  (subcutaneous  abscess,  renal  abscess, lethality) utilizing a genomically defined strains of methicillin‐resistant and other S. aureus. The  overall  goal  of  the  program  project  is  to  take  a  well‐integrated,  multi‐disciplinary  approach  to  understanding antibiotic resistance development and transmission, and to integrate that effort with the  search  for  compounds  that  compromise  resistant  pathogens,  including  methicillin‐resistant  S.  aureus  (MRSA),  by  inhibiting  novel  targets  and  pathways.    This  project  will  add  to  understanding  of  resistance  mechanisms related to multidrug efflux pumps and provide strains for testing the effect of such pumps  on novel compounds active against new targets and pathways.  It will also utilize mammalian models of a  common MRSA infection to test compound activity in vivo.