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多主枝孢霉QYW522合成10-HDA的代谢途径及关键酶研究
结题报告
批准号:
31171727
项目类别:
面上项目
资助金额:
64.0 万元
负责人:
王瑞明
依托单位:
学科分类:
C2003.食品微生物学
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
王腾飞、马春玲、李丕武、黎丽、王建彬
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中文摘要
10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-decenoic),简称10-HDA。目前,在自然界中仅在蜂王浆中发现,10-HDA具有多种生理活性,对革兰阴性菌有抑制作用,报道显示对部分癌细胞有抑制作用。近几年我们通过丝状真菌多主枝孢霉QYW522发酵获得了10-HDA,并且通过菌种筛选获得稳定菌株,对其进行紫外线复合LiCL诱变,获得菌株代谢10-HDA达到0.7g/L,并对其代谢途径开展相关研究,已成功获得油酸缺陷型菌株。要实现10-HDA的微生物生产有效提高,解决的前题是明确QYW522合成10-HDA的代谢途径及关键酶,因此本项目拟在前期工作的基础上,利用同位素2H、13C标记葡萄糖等底物,利用核磁共振等分析中间代谢产物,探索代谢途径及关键酶。
英文摘要
10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-decenoic acid, 10-HDA)。目前,在自然界中主要在蜂王浆中发现,10-HDA具有抗菌、抗氧化及抗肿瘤等多种生理活性。本研究以10-HDA合成候选关键酶ACP硫酯酶、细胞色素P450、电子转移黄素蛋白β和3-酮脂酰辅酶A硫解酶为研究对象,构建了重组表达载体,在毕赤酵母中进行了表达,分析其在合成代谢途径中的功能。通过研究外源添加中长链脂肪酸对10-HDA合成的影响,探讨10-HDA生物合成的关键途径,为提高生物合成10-HDA产量奠定基础。得到的主要结果如下:. 1. 成功实现了拟南芥ACP硫酯酶基因在毕赤酵母中的表达,重组菌胞外游离中链脂肪酸MCFAs的产量增加51%,表明ACP硫酯酶对中链脂肪酸生成具有控制作用,该研究也为安全生产MCFAs探索了一条新的途径。. 2 成功构建了10-HDA生物合成相关酶细胞色素P450、电子转移黄素蛋白β和3-酮脂酰辅酶A硫解酶的真核表达载体,实现了细胞色素P450基因在毕赤酵母中的表达,为进一步研究其功能奠定了基础。. 3. 通过饲喂蜜蜂10-HDA合成途径中的起始物硬脂酸及中间产物癸酸和10-羟基癸酸,发现均可显著提高蜜蜂10-HDA的产量,进一步揭示了10-HDA生物合成的途径。. 4. 总结出10-HDA在蜜蜂体内可能的生物合成途径,为进一步提高10-HDA的产量提供了理论依据。
期刊论文列表
专著列表
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专利列表
DOI:--
发表时间:2014
期刊:生物工程学报
影响因子:--
作者:李忠奎;郝梓凯;戴琨;王瑞明
通讯作者:王瑞明
DOI:--
发表时间:2014
期刊:中国食品学报
影响因子:--
作者:王腾飞;郝昭程;戴琨;王瑞明
通讯作者:王瑞明
DOI:--
发表时间:2013
期刊:现代食品科技
影响因子:--
作者:李俊霖;杨晓慧;王腾飞;王建彬
通讯作者:王建彬
DOI:--
发表时间:2013
期刊:现代食品科技
影响因子:--
作者:李俊霖;杨晓慧;王腾飞;王建彬
通讯作者:王建彬
Comporation of The Biosynthetic Pathway of 10-Hydroxy-2-Decenoic Acid between Microorganisms and Apis mellifera
微生物与意大利蜜蜂10-羟基-2-癸烯酸生物合成途径的比较
DOI:--
发表时间:2013
期刊:Journal of Pure and Applied Microbiology
影响因子:0.8
作者:Tengfei Wang;Xiang Zhang;Piwu Li
通讯作者:Piwu Li
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