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基于IDO2基因沉默的新型DC肿瘤疫苗及其抑瘤机制的实验研究
结题报告
批准号:
81160286
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
55.0 万元
负责人:
闵卫平
依托单位:
学科分类:
H1819.肿瘤生物治疗
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
王红梅、李卿、朱伟锋、黎曰真、刘燕玲、管小卉、廖琴、何静
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中文摘要
IDO是一种重要的免疫负调节因子,严重影响了以树突状细胞(DC)为基础的肿瘤免疫治疗效应。新近发现的IDO2系经典IDO的同源蛋白,其生物学和免疫学特性尚不明了,但却表现出比IDO1更强的抑制T细胞的抗肿瘤作用,因而我们设想抑制DC的IDO2表达将增强DC的抗肿瘤作用。本项目采用siRNA技术沉默DC的IDO2基因,并确定其生物学和免疫学特性;用肿瘤抗原制备IDO2沉默的DC疫苗,探讨与解析其抗肿瘤免疫效应及机制;同时设计一种全新的体内动员特异性IDO2沉默的DC抗肿瘤治疗的新方法:即通过Flt3-L体内动员DC,结合应用申请人创建的具特异性沉默DC中IDO2的免疫脂质体技术,评估这种新型抗肿瘤治疗方法的抑瘤作用。本项目系在分子水平上探讨基于siRNA技术修饰的新型DC肿瘤疫苗及其抑瘤机制,阐明下调DC中IDO2对肿瘤免疫应答的影响,为肿瘤的生物学治疗提供新思路。
英文摘要
吲哚胺2,3-双加氧酶2(IDO2)是与经典免疫负调控因子IDO1相似的一种蛋白,其酶解效率却明显低于IDO1,它的生物学功能还不是非常明了。它不但存在于机体的免疫系统如树突状细胞中,而且存在于多种肿瘤细胞中,与机体免疫及肿瘤密切相关。. 本课题主要探讨IDO2在肿瘤细胞中的生物学作用,研究其对增殖、凋亡、迁移及细胞周期的影响、在肿瘤形成生长中的作用,并以吲哚胺2,3-双加氧酶2为靶点进行体内治疗从而明确其在肿瘤治疗中的应用效果;以IDO2基因沉默的肿瘤疫苗治疗小鼠乳腺癌,明确IDO2在抗肿瘤免疫中的作用及机制。. 结果发现:一、沉默 IDO2 基因表达后B16-BL6细胞与阴性对照组细胞相比,其增殖能力受到明显抑制、G0/G1期细胞比例明显增加,而 S 期和 G2/M 期细胞比例则明显降低、其凋亡发生率较对照组明显增加、明显的迁移能力抑制;IDO2基因沉默可以减少其犬尿氨酸生成,减少NAD+生成同时增加细胞内活性氧ROS的含量;补充外源性NAD+可以减轻IDO2基因沉默引起的细胞凋亡。二、B16-BL6/IDO2+及B16-BL6/IDO2-稳定细胞株的建立:接种B16-BL6/IDO2-细胞至小鼠体内,其肿瘤形成时间明显较B16-BL6/IDO2+晚;其生长速度较对照组缓慢;肿瘤重量较对照组轻。三、IDO2-shRNA及scrambled-shRNA治疗荷黑色素瘤小鼠,结果显示IDO2-shRNA治疗组肿瘤的形成时间较晚,肿瘤的生长速度缓慢,离体肿瘤重量明显减轻;四、沉默小鼠骨髓细胞诱导的树突状细胞内IDO2基因, 不影响树突状细胞的凋亡,可以使表面共刺激分子MHCII、CD80、CD86、CD40的表达百分比增加,刺激异基因T淋巴细胞增殖的能力增强、诱导Treg细胞的百分比下降;五、以IDO2基因沉默的肿瘤疫苗治疗乳腺癌,可以抑制肿瘤生长,减轻肿瘤重量、明显提高机体的抗肿瘤免疫功能。. 本课题所进行的研究首次明确了IDO2基因在肿瘤细胞及体内肿瘤生长形成中的生物学作用;以IDO2作为治疗靶点,IDO2-shRNA治疗以及IDO2基因沉默的DC疫苗均可以明显抑制肿瘤的形成时间、减缓肿瘤生长速度,减轻离体肿瘤重量,增强体内抗肿瘤免疫能力;IDO2可能成为肿瘤治疗的新靶点。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国细胞生物学学报
影响因子:--
作者:王冰;王红梅;徐方云;闵卫平
通讯作者:闵卫平
Non-covalently functionalized single-walled carbon nanotube for topical siRNA delivery into melanoma
用于局部 siRNA 递送至黑色素瘤的非共价功能化单壁碳纳米管
DOI:10.1016/j.biomaterials.2013.12.079
发表时间:2014-03-01
期刊:BIOMATERIALS
影响因子:14
作者:Siu, King Sun;Chen, Di;Min, Wei-Ping
通讯作者:Min, Wei-Ping
Five COX-2 gene polymorphisms and risk of breast cancer: an updated meta-analysis based on 19 case–control studies
五种 COX-2 基因多态性与乳腺癌风险:基于 19 项病例对照研究的更新荟萃分析
DOI:10.1007/s12032-014-0397-6
发表时间:2014
期刊:Medical Oncology
影响因子:3.4
作者:Qing Li;Liu Liu;Yanling Liu;Hui Zhou;Z. Yang;K. Yuan;Weiping Min
通讯作者:Weiping Min
DOI:10.1021/bc500280q
发表时间:2014-09
期刊:Bioconjugate chemistry
影响因子:4.7
作者:K. Siu;Xiufen Zheng;Yanling Liu;Yujuan Zhang;Xusheng Zhang;Di Chen;Ken Yuan;E. Gillies;J. Kor
通讯作者:K. Siu;Xiufen Zheng;Yanling Liu;Yujuan Zhang;Xusheng Zhang;Di Chen;Ken Yuan;E. Gillies;J. Kor
Targeted siRNA Silencing of Indoleamine 2, 3-Dioxygenase in Antigen-presenting Cells Using Mannose- conjugated Liposomes: A Novel Strategy for Treatment of Melanoma
使用甘露糖缀合脂质体靶向 siRNA 沉默抗原呈递细胞中的吲哚胺 2, 3-双加氧酶:治疗黑色素瘤的新策略
DOI:10.1097/cji.0000000000000022
发表时间:2014-02-01
期刊:JOURNAL OF IMMUNOTHERAPY
影响因子:3.9
作者:Chen, Di;Koropatnick, James;Min, Wei-Ping
通讯作者:Min, Wei-Ping
miRNA-28/150调控耗竭性T细胞诱导免疫耐受在心脏移植中的作用及机制研究
  • 批准号:
    81660274
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    36.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    闵卫平
  • 依托单位:
miRNA调控T细胞耗竭的作用机制及其抗肿瘤生物治疗的研究
  • 批准号:
    81673009
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    闵卫平
  • 依托单位:
前列腺癌PIA-PIN-PCa恶性转化的免疫调控网络及其分子机制研究
  • 批准号:
    91229119
  • 项目类别:
    重大研究计划
  • 资助金额:
    85.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    闵卫平
  • 依托单位:
Tol-DC联合MSC免疫治疗类风湿关节炎的细胞与分子机制研究
  • 批准号:
    81273303
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    70.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    闵卫平
  • 依托单位:
国内基金
海外基金